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编号:443754
阔叶十大功劳总生物碱提取及小檗碱含量测定
http://www.100md.com 2015年11月27日 湖南中医药大学学报 2015年第6期
1仪器与材料,2实验方法与结果,1总生物碱含量测定方法的建立,2总生物碱提取工艺的优化,3阔叶十大功劳提取物中小檗碱含量HPLC测定方法的建立,3讨论,1关于紫外分光光度法测定总生物碱含量的波长选择,2关于样品的前处理
     周先强,田丹妹,余林健,许荣煌,唐金山,姚志红*

    (暨南大学药学院,中药及天然药物研究所及中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室,广东 广州510632)

    中药阔叶十大功劳为小檗科(Berberidaceae)十大功劳属阔叶十大功劳 [Mahonia bealei(Fort.)Carr.]的茎[1],具有滋阴补阳、清热解毒的功效,主治肺热、咳嗽、肠炎、痢疾、疮疡和湿疹等症[2]。

    阔叶十大功劳的主要活性物质为生物碱类化合物[3],其中小檗碱为主含成分。 小檗碱的降血脂作用最初在实验性治疗非胰岛素依赖型糖尿病模型中被发现[4],其后受到国内外研究学者关注。 研究表明[5-6],给高脂模型的实验鼠每天灌胃150~162 mg/kg 的小檗碱,6 周后实验鼠的游离脂肪酸比模型组明显降低;前期本课题组通过广泛筛选的方法, 发现中药阔叶十大功劳具有明显的HMGCoA 还原酶抑制活性,提示其具有良好的降血脂活性,对其中生物碱类成分进一步研究发现,小檗碱和巴马汀均显示出HMG-CoA 还原酶抑制活性。

    因此,本实验以总生物碱提取率为指标,采用紫外分光光度法测定总生物碱含量,结合正交设计法进行阔叶十大功劳中总生物碱提取工艺的筛选和优化, 并对其中主要活性成分小檗碱建立HPLC含量测定方法。

    1 仪器与材料

    Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪(G1379A在线脱气机、G1313A 四元梯度泵、G1311A 自动进样器、G1365B 紫外检测器,美国Agilent 公司);JASCO V-550 紫外可见分光光度计(佳司科(上海)贸易有限公司);Sartorius BP211D 电子天平(德国Sartorius 公司);昆山KQ3200E 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

    盐酸小檗碱对照品(上海睿升化工科技有限公司,批号:20131201,纯度98.9%);阔叶十大功劳提取物由本课题组提供;甲醇(迪马科技公司)、甲酸(广州泛宏贸易有限公司)、乙腈(迪马科技公司)均为色谱纯;蒸馏水(广州屈臣氏食品饮料有限公司)。阔叶十大功劳药材在广西武鸣县双桥乡采集,由广西中医药大学的韦松基教授鉴定为阔叶十大功劳(M. bealei) ......

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