电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤家兔SOD与线粒体膜电位的影响
1材料与方法,2结果,3结论
沈 菁,王 超*,张佳丽,刘 昭,刘 密,严 洁,常小荣,郭礼娜(湖南中医药大学针灸推拿学院,湖南 长沙 410208)
电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤家兔SOD与线粒体膜电位的影响
沈 菁,王 超*,张佳丽,刘 昭,刘 密,严 洁,常小荣,郭礼娜
(湖南中医药大学针灸推拿学院,湖南 长沙 410208)
目的 研究电针内关穴预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)家兔线粒体通透性转换孔(mPTP)开放的影响,及其心肌保护作用机制。方法 新西兰大耳白兔18只随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。采用冠脉结扎法造模,电针内关组在造模前,给予电针刺激20 min/d,共5 d。采用黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,荧光技术测定心肌细胞线粒体膜电位变化,分光光度法测定520 nm处线粒体吸光度的变化反映线粒体mPTP的开放,原位末端标记法测细胞凋亡。结果 与模型组比较,电针组心肌细胞SOD活力显著提高,凋亡指数降低(P<0.01),线粒体膜电位显著提高(P<0.05),线粒体吸光度明显降低(P<0.01)。结论 电针内关穴可以有效改善心肌缺血再灌注损伤,对心肌产生保护作用。
心肌缺血再灌注损伤;针灸;超氧化物歧化酶;线粒体膜电位;线粒体通透性转换孔
线粒体通透性转运孔(mPTP)开放目前被认为是心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的关键步骤,虽未完全阐明其机制,但大量研究已表明MIRI导致mPTP的开放,引起线粒体功能障碍,最终引起细胞损伤和死亡[1]。针灸作为一种特色的非损伤性中医治疗手段,可以诱导机体产生内源性保护物质,从而达到有效的心肌保护作用,对心血管疾病的防治有着十分重要的意义。本实验主要通过观察电针“内关”穴预处理对兔MIRI线粒体的影响,为电针“内关”穴对心肌的保护作用机制研究提供一种新思路。
1 材料与方法
1.1 实验动物
新西兰大耳白兔18只,体质量1.5~2.5 kg,由湖南中医药大学动物实验中心提供,许可证号:SCXK湘2011-0012,饲养温度20~25℃,湿度50%~70%。
1.2 主要试剂与设备
细胞线粒体分离试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 (上海碧云天生物公司),TUNEL细胞凋亡试剂盒(武汉博士德公司)。CRT960荧光分光光度计 (日本日立公司),UV754紫外可见光分光光度计 (上海第三分析仪器厂),ECG-9620P三道自动分析心电图机 (上海光电医用电子仪器有限公司) ......
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