脑泰方对动脉粥样硬化兔氧化应激的影响研究

    刘吉勇1，朱惠斌2，陈懿3，王国佐3，易亚乔3，葛金文3*

    (1.湖南中医药大学中医诊断研究所湖南省重点实验室湖南长沙410208；2.湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007；3.湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室，湖南长沙410208)

    〔摘要〕目的观察脑泰方对动脉粥样硬化兔氧化应激的影响，探讨脑泰方抗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用“高脂饲料喂养+免疫刺激方法”建立动脉粥样硬化兔模型，模型成功后随机分为脑泰方组、模型组、阿托伐他汀组，另设空白对照组，每组10只。药物干预后，采用酶联免疫法测定兔血清SOD、MDA及ox-LDL含量；采用PCR及Western Blot技术检测LOX-1、VCAM-1、ICAM-1及MCP-1相关基因及蛋白表达情况。结果模型兔SOD较空白对照组显著降低(P1 材料

    1.1实验动物

    1.2实验药物

    脑泰方：由黄芪、地龙、川芎等组成，由湖南中医药大学制剂实验室提供的中试样品，批号为20090801，含生药2 g/g。阿托伐他汀钙：Pharmaceuticals，产品批号：5837030。

    1.3主要试剂

    牛血清白(蛋白Roche公司)；SOD、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)；ox-LDL ELISA试剂盒(美国CSF公司)；MCP-1抗体(Abcam公司)；VCAM-1抗体、ICAM-1抗体、LOX-1抗体(Santa cruz biotechnology公司)；卵血清白蛋白、小鼠Actin、制胶、电泳和转膜试剂(美国Sigma公司)；HRP标记兔抗小鼠二抗(KPL公司)；蛋白抽提试剂盒、HaltTM蛋白酶抑制剂、SuperSignal West Femto超灵敏化学发光底物、BCA protein定量试剂盒(Pierce公司)；PVDF膜、SeeBlue Plus蛋白预染Marker、Trizol Reagent(美国Invitrogen公司)；RTPCR试剂盒(大连Takara生物公司)；TBE电泳缓冲液、100-1000bp DNA marker(北京天根生物公司)。

    2 方法

    2.1动物分组

    动物给予普通饲料适应性饲养1周。采用随机数字表法分为空白组，模型组，脑泰方组，阿托伐他汀组，每组20只。均单笼饲养，饮水不限，自由摄食，每天每只予150 g饲料。

    2.2造模方法

    黍粒小，播种浅加上春天风大、干旱 ......