张冬梅，张雅明*

    (上海中医药大学附属曙光医院，上海200000)

    苦参碱逆转人结肠癌细胞株(HT-29)奥沙利铂耐药性的作用及机制研究

    张冬梅，张雅明*

    (上海中医药大学附属曙光医院，上海200000)

    目的研究苦参碱对结肠癌耐药细胞HT-29/奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法采用逐步增加药物浓度的方法建立奥沙利铂耐药结肠癌细胞株HT-29/OXA;CCK-8法测定苦参碱对HT-29/OXA细胞的耐药性逆转作用，流式细胞术检测细胞凋亡、周期变化;实时定量PCR检测各组细胞肺耐药蛋白(lung resistance protein LRP)和P-glycoprotein(P-gp)mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞LRP和P-gp蛋白的表达水平。结果苦参碱使HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的敏感性增加，耐药性得到部分逆转。奥沙利铂(0.5μg/mL)和苦参碱(3.0μg/mL)单独用药对结肠癌耐药细胞株HT-29/OXA细胞周期以及细胞凋亡没有影响；联合用药对HT-29/OXA生长增殖具有明显抑制作用并且能够通过改变细胞周期引起凋亡(P<0.05)。奥沙利铂(0.5μg/mL)和苦参碱(3.0μg/mL)单独用药对HT-29/OXALRP和P-gp mRNA以及蛋白的表达没有影响；联合用药作用后LRP mRNA和P-gp mRNA表达水平降低(P<0.01)，同时下调了LRP和P-gp蛋白表达(P<0.01)。结论苦参碱部分逆转HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的耐药性，其机制可能与细胞内LRP和P-gp表达降低有关。

    结肠癌；HT-29;奥沙利铂；多药耐药性；苦参碱

    结肠癌的发病率以及死亡率位居我国恶性肿瘤的第三位，目前的治疗手段以手术切除为主，同时联合放疗、化疗来降低手复发率，提高生存率[1-2]。但目前应用的化疗药物以及方案的总体疗效并不理想，其主要原因是化疗过程中结肠癌细胞的多药耐药现象导致化疗失败[3-4]。苦参碱(Matrine)是中药苦参的主要活性成分之一,广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中，药用广泛。苦参碱是苦参中的抗癌有效成分，对肝癌、胃癌、肺癌、乳腺癌和直肠癌等细胞均具有生长抑制作用[5-9]，但是其对癌细胞耐药性的逆转作用尚未有报道。本研究旨在探讨苦参碱对结肠癌耐药细胞HT-29/奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。

    1 材料与仪器 ......