谢燕燕，卫 梅，谢德金，陈剑成，杨德明，荣俊冬，陈礼光，郑郁善,*(.福建农林大学林学院，福建 福州 35000；.福建农林大学园林学院，福建 福州 35000)

    凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织的制备研究

    谢燕燕1，卫 梅2，谢德金1，陈剑成1，杨德明1，荣俊冬1，陈礼光1，郑郁善1,2*

    (1.福建农林大学林学院，福建 福州 350002；2.福建农林大学园林学院，福建 福州 350002)

    目的 研究凹叶厚朴适用于细胞悬浮培养的愈伤组织。方法 通过对基本培养基(B5、MS和1/2MS)、外植体(茎段、顶芽和叶片)、激素浓度及组合进行筛选的方法进行厚朴愈伤组织诱导和继代研究。结果 B5为最适合厚朴愈伤组织诱导的基本培养基；顶芽是最佳诱导愈伤组织的材料；最适合厚朴愈伤组织诱导的培养基为B5+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA；最佳继代培养基为B5+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA，愈伤组织生长倍数达到2.87倍。结论 初步筛选出凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织，为凹叶厚朴细胞培养奠定基础。

    凹叶厚朴；愈伤组织；悬浮培养

    本文引用：谢燕燕，卫 梅，谢德金，陈剑成，杨德明，荣俊冬，陈礼光，郑郁善.凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织的制备研究[J].湖南中医药大学学报，2017，37(4)：365-368.

    凹叶厚朴 Magnolia officinalis subsp.biloba (Rehd.et Wils.)Law，为木兰科木兰属皱皮木兰的植物[1-2]，集材用、药用、观赏于一体，为我国特有的经济树种，也是国家二级重点保护野生植物[3]。厚朴以干燥树皮和根皮入药，主要用于治疗食积气滞、腹胀便秘、湿阻中焦、脘痞吐泻、痰壅气逆、胸满喘咳等[4]。厚朴药用有效成分主要为厚朴酚及和厚朴酚[5]。近年来，人们过度砍伐厚朴植株，使厚朴资源急剧减少。如今野生资源濒临枯竭，厚朴需 20年左右才能成材入药，如何快速生产有用的植物药物及代谢物质成为热点问题。有相关研究表明植物细胞悬浮培养技术可批量生产有用的植物药物及代谢物质[6]，而用于培养厚朴悬浮细胞的愈伤组织的制备成为至关重要的一步。选择生长速度快、疏松易碎的愈伤组织是进行细胞悬浮培养的关键[7]。故本研究通过优化厚朴愈伤组织诱导体系，筛选出最适合用于细胞悬浮培养的愈伤组织的培养条件，以期为今后培养厚朴细胞提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    本次研究的试验材料由福建农林大学工业原料林研究所提供的厚朴 (Magnolia officinalis)优树植株 ......