申奏秦旋，申可佳*，熊 桀，王 肖，王宇航，吴华英，邓 文

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.郑州大学第一附属医院生殖中心，河南 郑州 450052)

    护卵汤对多周期促排卵小鼠子宫内膜ER/PR蛋白表达的影响

    申奏秦旋1，申可佳1*，熊 桀1，王 肖2，王宇航1，吴华英1，邓 文1

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.郑州大学第一附属医院生殖中心，河南 郑州 450052)

    目的 观察中药护卵汤对反复多周期促排卵小鼠子宫内膜容受性的干预作用，为中医药辅治体外受精-胚胎移植(IVF-ET)提供更多的实验依据。方法 建立反复多周期促排卵小鼠模型(模型组)，部分给予中药护卵汤治疗(中药组)，以及未使用药物的自然周期小鼠为正常对照(空白组)。比较各组在孕2 d、孕5 d两个时间段的子宫形态及雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的蛋白表达。结果 子宫内膜光学形态：与空白组和中药组相比，孕5 d模型组小鼠子宫内膜发育明显不良。子宫内膜ER蛋白表达：与模型组相比，孕2 d和孕5 d中药组小鼠子宫内膜ER蛋白表达均增加，差异有统计学意义 (P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 健康SPF级昆明雌性小鼠60只，体质量为19～25 g。第4周购入性成熟雄性小鼠30只。以上动物均由湖南中医药大学动物实验中心提供，实验动物许可证号：SYXK(湘)2009-0001。

    1.1.2 药物 中药煎剂：护卵汤的组方为熟地黄10 g，生地黄10 g，沙参10 g，石斛10 g，山药10 g，莲子10 g，桑椹子10 g，覆盆子10 g，菟丝子10 g，月季花10 g，莲子心3 g，肉苁蓉10 g，甘草3 g。以上饮片购自湖南中医药大学第一附属医院药房，购回后加水浸泡2 h，火上煎煮3次，将3次煎液混合浓缩成1 g/mL的药液，灭菌，4℃保存供实验使用。西药：注射用尿促性腺激素(HMG)由中国丽珠集团丽宝生物化学制药有限公司生产，批号1007234；注射用绒毛膜促性腺激素(HCG)由中国丽珠集团丽宝生物化学制药有限公司生产，批号1006137。

    1.1.3 试剂 HE染色：10%甲醛固定，二甲苯脱蜡，70%、80%、95%酒精，苏木素，1%盐酸酒精，1%稀氨水，伊红，二甲苯透明标本；ER、PR测定：SP免疫组化染色检测。以上试剂均购自湖南丽欣生物有限公司或自己配制。

    1.1.4 仪器 光学显微镜(日本Olympus CX21)；石蜡切片机(英国Shandon 325)；超薄切片机(瑞典LKB-Ⅲ)；显微图像摄像系统 (麦克奥迪实业集团公司Motic B5)；图像分析软件(美国Image-Pro Plus 6.0) ......