廖俞强，邓奕辉，颜佳博，李钰佳，李定祥*

    (湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

    滋阴活血解毒方对AGEs诱导VEC损伤黏附分子及凝血相关因子表达的影响

    廖俞强，邓奕辉，颜佳博，李钰佳，李定祥*

    (湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

    目的 观察滋阴活血解毒方对糖基化终末产物(advanced glycation end-producs，AGEs)诱导血管内皮细胞(vascular endothelial cell，VEC)损伤的影响及其黏附分子、凝血相关因子表达的变化，进一步探讨该方对AGEs诱导VEC损伤的保护作用。方法 以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)作为实验对象，以终浓度(100 mg/L)的AGEs诱导HUVEC损伤。各模型组及给药组细胞分别继续培养12、24、48 h。在显微镜下观察各组细胞形态变化，并以Western-blot法检测各组黏附分子VCAM-1、ICAM-1的表达；以RT-PCR方法检测TF、TM mRNA表达。结果 相对于空白组细胞，模型组细胞出现异常增殖，细胞数量明显增多，多数细胞变形皱缩，胞膜轮廓模糊，细胞内出现粗糙样颗粒变化，VCAM-1、ICAM-1、TF表达明显上调，TM表达下调，且在作用24 h后差异有显著性意义(P1 实验材料

    1.1 试剂及仪器

    人血清白蛋白(Sigma，批号：A8230-500)，D-葡萄糖(Amresco，批号：0188)，青霉素(Amresco，批号：A8180-1)，庆大霉素(Amresco，批号：G8170-500)，吩嗪硫酸二甲酯(Sigma，批号：P8110-1)，胰蛋白酶-EDTA消化液(solarbio，批号：T1320)，磷酸缓冲液 (phosphate buffer saline，PBS)(Hyclone，批号：SH30256.01)，兔抗ICAM-1第一抗体(abcam，批号：Ab53013)，兔抗VCAM-1(abcam，批号：Ab134047)，TF及TM逆转录试剂盒(北京康为世纪公司，批号：A150311)。FA-N精密天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)、Motic BA210T显微镜 (杭州明凯科技有限公司)等。

    1.2 实验药剂配制

    滋阴活血解毒方(熟地黄20 g，枸杞子12 g，山茱萸12 g，黄芪 30 g，黄连 10 g，川芎 12 g，地龙12 g，丹参20 g，水蛭8 g ......