邓桂明,蒋司晨,肖小芹*,成绍武,贺艳萍,陈 镇，欧阳林旗,向 彪，舒圆月

    (1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

    咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响

    邓桂明1,蒋司晨1,肖小芹2*,成绍武2,贺艳萍2,陈 镇1，欧阳林旗1,向 彪1，舒圆月2

    (1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

    目的 观察咳喘穴位敷贴对慢性支气管哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响。方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、咳喘穴位敷贴组、地塞米松组，每组10只。除对照组外，其余各组采用卵清蛋白致敏并激发的方法制备慢性支气管哮喘大鼠模型。造模成功后，咳喘穴位敷贴组大鼠相应穴位贴敷咳喘穴位敷贴进行干预治疗，地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液0.5 mg/(kg·d)。治疗14 d后取大鼠肺组织，HE染色观察肺组织形态学变化，免疫组织化学、Real time PCR检测肺组织JAK1和STAT6蛋白及mRNA的表达水平。结果 与对照组相比，哮喘模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润，气道内有大量分泌物，肺泡结构紊乱；与哮喘模型组相比，咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠肺组织炎性细胞浸润减少、气道分泌物减少、肺泡排列规则。与对照组相比，哮喘模型组大鼠气道上皮 JAK1、STAT6蛋白和mRNA表达明显升高(P1 材料

    1.1 实验动物

    SPF级SD大鼠40只，雄性，体质量(160±10)g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。实验动物许可证号：SCXK(湘)2015-0003。饲养条件：自然光照，室温20～25℃，相对湿度40%～70%，自由摄食与饮水，适应性喂养1周。

    1.2 实验药物

    咳喘穴位敷贴散由白芥子、麻黄、丁香、肉桂、甘遂、延胡索等组成，所有处方药材均购自湖南新汇制药股份有限公司，地塞米松磷酸钠注射液(1 mL∶5 mg，国药准字H41020036，国药集团容生制药有限公司)。

    1.3 主要试剂

    鸡卵清蛋白(美国Sigma公司)；兔抗大鼠JAK1多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)；兔抗大鼠STAT6多克隆抗体 (博士德生物工程有限公司)；第二代通用型二步法检测试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)；DAB显色剂(博士德生物工程有限公司)；Trizol RNA提取液、逆转录试剂盒、荧光实时定量PCR试剂盒(大连Takara公司) ......