李迎秋,蒋艳菲,张叔琦,赵雪君,曹 卉,杨 雪,卓海燕,张国民*

    (湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

    壮骨止痛胶囊含药血清对成骨细胞CDK4和p21表达的影响

    李迎秋,蒋艳菲,张叔琦,赵雪君,曹 卉,杨 雪,卓海燕,张国民*

    (湖南中医药大学，湖南 长沙 410208)

    目的观察壮骨止痛胶囊含药血清对成骨细胞CDK4和p21表达的影响，探讨壮骨止痛胶囊治疗骨质疏松症的机制。方法40只SD雌性大鼠随机分为模型组、阳性对照组、壮骨止痛胶囊组、假手术组，每组10只。模型组、阳性对照组以及壮骨止痛胶囊组的SD大鼠制作骨质疏松大鼠模型，假手术组SD大鼠作为对照。不同组SD大鼠喂养不同药物，假手术组和模型组大鼠灌胃生理盐水，阳性对照组灌胃尼尔雌醇，壮骨止痛胶囊组灌胃壮骨止痛胶囊药物，连续喂养13周之后，处死大鼠，提取各组大鼠含药血清备用。另取5只新生SD小鼠颅骨的成骨细胞，应用上述各组含药血清进行细胞培养，连续培养3代后，采用碱性磷酸酶染色和茜素红染色法鉴定成骨细胞，细胞免疫组化法检测各组含药血清培养的成骨细胞CDK4蛋白和p21蛋白的表达。结果CDK4和p21蛋白阳性表达主要在成骨细胞的细胞核。与假手术组比较，模型组CDK4表达轻度降低，p21表达轻度升高(P>0.05)；与模型组比较，阳性对照组和壮骨止痛胶囊组 CDK4表达均升高，p21表达均下降(P<0.01)；与阳性对照组比较，壮骨止痛胶囊组CDK4表达升高，p21表达下降(P<0.01)。结论壮骨止痛胶囊可通过提高成骨细胞CDK4的表达，抑制p21的表达，从而增加成骨细胞G1期调节蛋白的表达，推动增殖周期的完成，达到治疗骨质疏松症的目的。

    CDK4；p21；壮骨止痛胶囊；骨质疏松症

    骨质疏松症是指由于单位体积内骨量减少、骨组织显微结构明显衰退、骨密度降低等引起骨折危险性增加的全身性骨代谢疾病[1]。有关资料显示[2-3]，随着社会人口老龄化趋势，骨质疏松症患者日益剧增。骨质疏松症在中医学认识上近似于中医学“骨痿”病。多属虚证，病位在骨，与肝肾脾密切相关[4]。治疗原则是补肝肾、强筋骨。壮骨止痛胶囊，具有补益肝肾、壮骨止痛功效，能有效治疗骨质疏松症[5]。但其具体作用机制尚无文献完全阐明。本试验拟通过研究壮骨止痛胶囊对体外成骨细胞G1期调节蛋白CDK4和p21表达的影响及其作用，探讨其抗骨质疏松症的具体作用机制。

    1 材料

    1.1 实验动物

    SPF级6月龄的雌性SD大鼠40只 ......