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编号:13571019
五倍子酯提物抗流感病毒诱导的小鼠急性肺损伤作用机制(2)
http://www.100md.com 2018年12月1日 《湖南中医药大学学报》 201812
     2.2 检测指标及鉴定模型

    各组分别于第2、4、6天给药后随机处理动物,每次4只,取肺泡灌洗液及肺组织进行指标检测。观察小鼠感染病毒后日常活动状态、肺解剖标本、肺病理切片并检测肺泡灌洗液内炎性因子含量及TLR4、MyD88、TRAF6蛋白表达情况。

    2.2.1 小鼠活动状态及肺组织解剖学观察 每天观察各组小鼠活动状态,对小鼠肺进行大体解剖学观察并拍照记录。

    2.2.2 ELISA法检测肺泡灌洗液中炎性因子的含量 用10%水合氯醛麻醉小鼠,切开颈部皮肤,暴露气管,在第2~3气管环处用手术刀片挑开一小“一”字形切口,插入清洁灌胃针头,结扎固定,连续2次用PBS缓冲液1.5 mL灌洗肺部,收集支气管肺泡灌洗液约2 mL,1 000 r/min离心15 min,取上清液保存于-20 ℃冰箱。用ELISA法检测各组肺泡灌洗液中IL-6、IL-10的含量。检测程序及方法按照ELISA试剂盒说明书进行。

    2.2.3 HE检测小鼠肺部炎症情况 超净工作台上摘取肺组织,切成0.5 cm3大小,4%多聚甲醛固定、脱水、透明、石蜡包埋切片,5 μm厚切片,经苏木精和伊红染色、中性树胶封片 ......
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