2.4.3 Western blot检测SCN中Clock、Bmal1蛋白表达水平 用Western blot检测4组大鼠SCN中Clock和Bmal1的蛋白表达量，内参为β-actin。取SCN脑组织20 mg，加蛋白裂解液，冰上研磨，以4 ℃、12 000 r/min离心30 min，取上清，用BCA蛋白质试剂盒分别测定4组蛋白量;依次加样、凝胶电泳、转膜和室温封闭;按抗体说明书加入一抗Clock和一抗Bmal1(Clock稀释度为1∶400，Bmal1稀释度为1∶200)，置4 ℃冰箱过夜，洗膜，再加入二抗(稀释度为1∶3 000)，ECL显色;置于凝胶图像成像分析系统，曝光各组蛋白条带，拍照，分析灰度值。

    2.5 统计学方法

    所有数据均运用统计软件SPSS 19.0处理，实验数据以“x±s”表示，组间比较采用单因素方差分析，多组间比较采用LSD法，P<0.05为差异具有统计学意义。

    3 结果

    3.1 自主活动时间检测结果

    从表1和图1可以看出，与空白组比较，模型组大鼠TL、TD、TALL明显增加(P<0.01);与模型组比较，舒乐安定组和酸枣仁汤组大鼠TL、TD、TALL均有减少(P<0.01 ......