2016-2018年临床分离铜绿假单胞菌的耐药情况分析(2)
1.2 仪器与试剂Vitek-2 Compact全自动微生物鉴定仪及配套试剂、TDR-300B plus天地人系统微生物鉴定仪及配套试剂,ABsteponeplus基因扩增仪,柯达凝胶成像系统,BIO-RAD电泳仪。DNA提取试剂盒为OMEGA试剂盒。
1.3 药敏试验
药敏试验操作、结果判定采用CLSI2016- 2018 年版标准推荐的最低抑菌浓度(MIC)法。多重耐药铜绿假单胞菌(multiresistant pseudomonas aeruginosa,MRPA)的判定:对下面5类抗菌药中的3类及以上药物耐药包括头孢菌素类(如头孢吡肟)、氟喹诺酮类(如左旋氧氟沙星)、碳青霉稀类(如美罗培南)、B-内酰胺酶抑制剂(哌拉西林/他唑巴坦)和氨基糖苷类(妥布霉素)。
1.4 整合子基因扩增
按照OMEGA试剂盒说明书提取DNA,参考文献[6]设计引物,引物intⅠ1-F和intⅠ1-R由湖南擎科生物技术有限公司合成,扩增条件为:95 ℃ 5 min;95 ℃ 20 s,52.5 ℃ 30 s, 72 ℃ 1 min ......
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