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编号:13539587
HIV/AIDS患者外周血中4种细胞因子IL-2、IL-4、IL-15和IL-21表达水平及其临床意义研究(2)
http://www.100md.com 2019年8月1日 《湖南中医药大学学报》 20198
     1.2 外周血淋巴细胞亚群检测和血浆HIV RNA定量检测

    40例HIV-AIDS患者以EDTA真空采血管采集静脉血2 mL,每支试管各取100 μL全血分别加入CD3-PreCP、CD4-PE、CD8-PE荧光单克隆抗体(美国BD 公司),混合后置室温避光孵育,加入溶血素再避光孵育,离心弃上清PBS洗涤2次,送FACS Calibur 型流式细胞仪(美国BD公司)检测,以Cell Guest 软件收集分析处理好的标本,分析 CD3+总T淋巴细胞数、CD3+、CD4+淋巴细胞数和CD3+、CD4+ 淋巴细胞数。离心分离的血浆置-80 ℃保存待测,HIV 核酸扩增荧光定量检测(FQPCR HIV RNA)试剂盒(深圳市PG生物工程公司提供,国药准字SZ20020041),Gene Amp 7300序列检测系统(美国PE公司)。操作程序严格按照试剂盒说明书进行,定量线性范围 50 拷贝/mL~1 000 000拷贝/mL。

    1.3 外周血细胞因子的血清浓度检测

    使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定40例HIV/AIDS和31名正常对照者血清中细胞因子的浓度 ......
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