降糖增效方对糖尿病大鼠肝脏胰岛素信号通路IRS1位点磷酸化的影响(3)
2.5 Western Blot检测P-IRS1 ser 307、612、1101蛋白表达 每组取6只大鼠肝组织,RIPA裂解提取总蛋白,高温蛋白变性,检测蛋白浓度;12% SDS-PAGE 凝胶电泳100 V 1.5 h,半干法转膜后TBS溶液洗10 min;Blocking one/Blocking one-P封闭30 min,一抗(1∶1 000稀释)4 ℃孵育过夜;洗膜,二抗(1∶10 000)室温1 h。洗膜后ECL发光液避光孵育2 min,凝胶成像系统显影,Image J 7.0软件进行图像分析,以目的蛋白/内参蛋白灰度值计算蛋白表达水平。2.6 统计学方法
采用SPSS 19.0软件处理数据,数据用“x±s”表示,多组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)方法;两组间比较,满足方差齐性时用 LSD 检验,不满足方差齐性时用非参数检验;P<0.05表示差异有统计学意义,P<0.01表示差异有显著统计学意义。
3 结果
3.1 各组大鼠FBG比较
与正常组比较 ......
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