芍药苷通过促进细胞自噬抑制H2O2诱导的SH-SY5Y细胞的氧化损伤(3)
1.3 主要仪器加热型五段程控金属浴(北京天根生化科技有限公司);化学发光凝胶成像仪(美国BIO-RAD公司);小型台式离心机、CO2培养箱(美国Thermo Fisher公司);倒置荧光显微镜(德国ZEISS公司);多功能酶标仪(美国BioTek公司);共聚焦激光显微镜(日本Nikon公司)。
2 方法
2.1 建立H2O2诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型
模型建立步骤参照本课题组前期发表文献[18]。
2.2 实验分组
待细胞融合至80%左右时,接种细胞:12孔板约1×105个/孔、6孔板约4×105个/孔。将细胞置于培养箱中培养过夜,根据实验需求给予不同处理,分别设置对照组、模型组(250 μmol/L H2O2)和芍药苷低(5 μmol/L)、中(10 μmol/L)、高(20 μmol/L)剂量组。
2.3 细胞内ROS水平检测
12孔板中经处理后的细胞 ......
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