祁 芳，李艳玲，艾 坤*，蔡 雄，李 鑫，刘 梨，杨茜芸

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙410208，2.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙410007)

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种病因不明、发病率高、致残率高的慢性自身免疫性疾病[1]，治疗棘手。中医针灸治疗RA 历史悠久、疗效甚佳，因此，RA 的疾病发展机制以及针灸治疗RA的干预机制持续成为了医学界的研究热点。 现有的研究证实，人体内核因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB) 炎性通路的激活在RA 的发生发展中有着至关重要的作用[2]。 本实验以NF-κB 信号通路为切入点，通过电针佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠模型，在证实电针抗炎作用的基础上，通过检测大鼠踝关节滑膜细胞胞浆内NF-κB 信号通路上游的前信号因子IκB 的磷酸化水平，进一步揭示电针可能的抗炎机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物与分组

    由湖南中医药大学实验中心提供的SPF 级雄性SD 大鼠70 只，体质量(100±15) g，动物许可证号：SYXK(湘)2013-0005，在条件适宜的SPF 级实验室喂养1 周后，用电子秤测量每只大鼠体质量，根据测量结果进行体质量的分层(10 g 一分层)，挑选体质量为(130±15) g 的大鼠纳入实验，体质量偏轻或偏重者剔除，最终保留60 只体质量均匀的大鼠，然后将不同体质量层次的大鼠随机分至正常组、模型组、甲氨蝶呤组(MTX 组)和电针组，每组15 只。

    1.2 主要试剂与仪器

    矿物油(湖南惟世尔科技有限公司)；灭活结核杆菌(美国Difco 实验室)；异氟烷(上海佳行股份有限公司)；AIMS 型动物纹身仪(深圳Reward 公司)；RWD510 型小动物呼吸麻醉机(山东格莱特股份有限公司)；移液枪(杭州雷琪实验器材有限公司)；Hamilton 250 μL 型微量注射器(北京Bloning 有限公司)；足肿测量仪(MGO37140 UGO Basile)；bt701-1b 型电针治疗仪(苏州医疗用品厂制造)。

    1.3 佐剂制备[2]

    高温灭菌后的干燥研钵置于精密天平上准确称取结核杆菌15 mg；用移液枪精密吸取矿物油12 mL加入研钵中充分研磨，直至矿物油清亮无明显悬浮杂质；将研磨好的MT 悬浮液移入EP 管中 ......