李亚梅 宾雨飞 夏伯候 罗弘杉 徐佳 张鹏 龚云 廖端芳 林丽美

    〔摘要〕 目的 研究補血益母丸干预气血两虚模型小鼠内源性代谢物的变化，寻找与治疗气血两虚相关的代谢生物标志物，探讨补血益母丸对气血两虚模型的调节作用及可能机制。方法 采用眼眶放血和腹腔注射环磷酰胺建立气血两虚小鼠模型，造模成功后将动物分为模型组、乳酸亚铁组、四物汤组、补血益母丸低剂量组和补血益母丸高剂量组，借助气相色谱质谱联用(GC-MS)技术，对小鼠血清样本代谢物进行检测，采用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物。应用ELISA法检测小鼠血清中促红细胞生成素(EPO)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素2(IL-2)的含量。结果 对照组、模型组和补血益母丸治疗组血清样本能够得到很好的区分，共鉴定出14种潜在生物标志物，补血益母丸给药后气血两虚小鼠的内源性代谢物水平发生不同程度的回调。与正常组相比，模型组小鼠血清中TNF-α明显升高(P1的变量被认为对分类起着关键作用，见图3。对筛选的差异代谢物进行显著性检验，同时符合VIP>1且P<0.05的6个变量被认为与血虚有潜在关联，并利用KEGG、HMDB等数据库对变量结构鉴定并用标准品验证(表2)，从表2可知，与正常组相比，模型组小鼠血清中的缬氨酸、尿素、甘氨酸、2-丁烯二酸、脯氨酸、十六酸、亚油酸、十八酸、花生四烯酸水平均显著下调，而3-羟基丁酸、异亮氨酸、苏氨酸、果糖、葡萄糖含量显著上调。这14种物质被确定为气血两虚小鼠血清潜在代谢标志物。

    3.1.4? 潜在生物标记物层次聚类分析? 层次聚类分析获得潜在生物标志物的热力图 ......