李小娜 李开瑞 何迎春 徐朝军 宋岚

    〔摘要〕 目的 研究血根碱(sanguinarine， SAN)对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 将肺腺癌A549细胞随机分为空白组、SAN不同浓度(1.25、2.5、5、10 μmol/L)组、阳性组。采用噻唑蓝[3-(4，5-dimethyl-2-thiazolyl)-2，5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide， thiazolyl blue tetrazolium bromide， MTT]法和实时无标记动态细胞分析技术(real time cellular analysis， RTCA)检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测增殖相关蛋白(PCNA)、周期相關蛋白(Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4)、凋亡相关蛋白(Bax、XIAP、Survivin)表达水平。结果 MTT法和RTCA检测结果均显示，不同浓度SAN均能够抑制肺腺癌A549细胞增殖(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示，不同浓度SAN(2.5、5 μmol/L)处理肺腺癌A549细胞24 h后，其G1期比例显著增加(P<0.01)。AnnexinV-FITC/PI双荧光染色法结果，经SAN(2.5、5 μmol/L)处理24 h后的肺腺癌A549细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。Western blot结果显示，经SAN干预后的肺腺癌A549细胞的增殖相关蛋白PCNA(P<0.01)、周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4(P<0.01)、抗凋亡蛋白Survivin、XIAP(P<0.05或P<0.01)表达水平均显著降低 ......