蓝兆 何嘉 陈进晓 沃达 马恩 彭军 朱伟东 任丹妮

    〔摘要〕 目的 探讨八宝丹(Babao Dan， BBD)通过AKT与ERK信号通路对小鼠乳腺癌(4T1)细胞增殖的影响。方法 CCK8法检测不同浓度(0.25、0.5、0.75 mg/mL) BBD干预不同时间点(24、48、72 h)的4T1细胞活力;镜下观察无血清对照组、血清组、BBD低剂量组(0.5 mg/mL)、BBD高剂量组(0.75 mg/mL)中4T1细胞的增殖变化;Western blot法检测10%胎牛血清(FBS)刺激不同时间点(0、5、15、30、60、120 min)后4T1细胞中p-AKT、p-ERK的蛋白表达水平，以确认信号通路激活的最佳时间。与此同时，将4T1细胞随机分为6组：对照组、模型组、BBD低剂量组、BBD高剂量组、U0126组(10 μmol/L)和LY294002组(20 μmol/L)，采用Western blot法检测p-AKT、p-ERK的蛋白表达水平;最后将对数增长期的4T1细胞随机分为对照组、BBD组、U0126组(ERK信号通路抑制剂)、LY294002组(AKT信号通路抑制剂)、BBD+U0126组、BBD+LY294002组、U0126+LY294002、BBD+U0126+LY294002组8组，通过台盼蓝染色法检测以上各组干预24、48、72 h后对4T1细胞增殖的影响。结果 CCK8法结果表明，与对照组相比，不同浓度BBD干预24、48、72 h后细胞活力均显著下降，差异具有统计学意义(P<0.001)。镜下观察可见，与无血清对照组相比，血清组细胞形态饱满且生长迅速;与血清组相比，BBD低剂量组以及BBD高剂量组细胞生长缓慢。Western blot结果显示，与0 min比较，10% FBS干预5 min时p-ERK蛋白表达显著升高(P<0.05) ......