李涵 刘慧萍 肖贾丽珏 杨开锋 辛雨霏

    〔摘要〕 目的 观察补肾活血方对卵巢功能早衰模型大鼠卵巢组织中外泌体相关膜蛋白表达情况及卵巢组织形态和功能的影响。方法 选取30只大鼠，腹腔注射顺铂建立卵巢功能早衰模型，造模成功后随机分为模型组、阳性对照组和中药低、中、高剂量组，每组6只。另取6只大鼠为空白组。空白组和模型组大鼠每天灌胃蒸馏水;中药低、中、高剂量组分别按每天9.72、19.44、38.88 g/kg剂量补肾活血方灌胃;阳性对照组大鼠按每天0.09 mg/kg剂量灌胃给药戊酸雌二醇片，连续21 d。每周称体质量，计算体质量增量，每天观察大鼠动情周期。末次给药后于第2天取血和卵巢、胸腺、脾脏，称脏器质量，计算脏器指数;ELISA检测大鼠血清中雌二醇(estradiol 2， E2)和抗米勒管激素(anti-Müllerian hormone， AMH)水平变化含量;HE染色观察卵巢形态变化;免疫组织化学法检测卵巢组织中外泌体膜蛋白CD63、CD81、CD82的表达水平;透射电镜观察大鼠外周血外泌体形态;Western blot检测大鼠外周血外泌体相关蛋白。结果 与空白组相比，模型组动情周期紊乱、AMH和E2减少(P0.05)。与阳性对照组比较，中药低剂量组AMH水平明显降低(P0.05)。中药各剂量组间AMH和E2水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

    3.3 ?各组大鼠体质量和脏器指数

    与空白组比较，模型组卵巢指数、胸腺指数、体质量、体质量增量均明显减少(P0.05)。中药低剂量组卵巢指数、胸腺指数、脾脏指数、体质量、体质量增量与模型组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。与阳性对照组比较，中药低剂量组卵巢指数、体质量和体质量增量均明显降低(P0.05)。与中药高剂量组比较，中药低剂量组卵巢指数、体质量、体质量增量均明显降低(P0.05) ......