张玉婷，谢小娟*，王彩云，张梦露

    (河南科技大学第一附属医院/河南科技大学临床医学院，河南 洛阳 471003)

    七氟烷是临床上常见的挥发性麻醉药，具有麻醉效果好、性质稳定等优点，但七氟烷可引起神经障碍，影响认知功能[1]。 麻醉相关认知障碍常发生在老年患者手术之后，这种现象称为术后认知功能障碍，60 岁以上老年患者出现术后认知功能障碍的比例约为25%[2]。 有研究[3]发现，七氟烷能够诱导神经细胞铁死亡，这可能是七氟烷损伤神经的机制之一。寻找减轻七氟烷造成神经损伤的有效方法是临床麻醉研究中的难点之一。灵芝是十分珍贵的药用真菌，灵芝酸A(ganoderic acid A, GAA)是从灵芝中分离出来的三萜类活性成分，有解毒、镇静、止痛、保肝、抗肿瘤等作用[4]。 另外，GAA 还具有降低胆固醇、调节免疫等作用[5]。有研究[6]发现，GAA 可改善氯化锂-匹鲁卡品诱导的癫痫大鼠海马神经元损伤，对癫痫神经元损伤有改善功效。 此外，GAA 可以减弱Aβ25-35 诱导的HT22 细胞活力降低、 细胞凋亡和衰老[7]。与此同时，GAA 也可以通过刺激β 肾上腺素能受体在体外保护神经细胞免受NO 诱导的应激损伤[8]。 因此，推测GAA 可能对于神经细胞具有保护作用，使其免受外界不良刺激引发的应激反应。与此同时，细胞铁死亡与氧化应激又具有密切的联系[9]，核转录因子E2 相关因子2(nuclear factor erythroidrelated factor 2, Nrf2)具有抗氧化应激的作用，Nrf2可诱导谷胱甘肽过氧化物酶4(phospholipid glutathione peroxidase 4, GPX4)表达、抵抗氧化应激，进而减少铁死亡，神经认知功能障碍与Nrf2/GPX4信号通路调控的神经元细胞铁死亡有关[10]。 目前，对GAA 影响七氟烷诱导的神经细胞铁死亡的作用和机制尚不清楚。本研究探讨GAA 对七氟烷诱导的小鼠海马神经元HT22 细胞铁死亡的影响和作用机制，为七氟烷麻醉神经损伤的治疗提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 细胞

    小鼠海马神经元HT22 细胞(CL-0697)购自武汉普诺赛生命科技有限公司，使用含有10%胎牛血清的DMEM 培养液培养细胞，置于含有5% CO2的37 ℃恒温培养箱中培养。

    1.2 主要试剂和仪器

    Fe2+检测试剂盒(E1042-100)，购自北京普利莱基因技术有限公司；兔抗GPX4 抗体 ......