基于网络药理学及体内外实验研究连翘不同提取液抗RSV 作用
林组,利巴韦,1材料,1主要的仪器设备,2药品及主要试剂,3实验细胞与病毒,4实验动物,2方法,1连翘抗RSV的机制研究20,2连翘不同提取液抗RSV的体外实验研究,3连翘煎煮离心液抗RSV的体内实验
王 平,马元荣*,张会敏(1.山东省中医药研究院,山东 济南 250014;2.天津大学精密测试技术及仪器国家重点实验室,天津 300072;3.山东省济南市长清区平安街道社区卫生服务中心,山东 济南 250300)
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)隶属副黏液病毒科肺炎病毒属[1],是诱发婴幼儿、老年人及免疫功能低下者呼吸道感染常见的RNA 病毒[2-3]。 感染发病率高,以不同程度的发热、咳嗽、咽痛及呼吸急促为常见临床症状[4],若病情未得到及时有效的控制,极易发生哮喘、急性呼吸衰竭及心力衰竭,甚至死亡[5-8]。 临床对RSV 患者常给予利巴韦林、干扰素治疗[9],但上述药物疗效有限,常出现发热、过敏等不良反应[10-11]。目前RSV 感染的流行趋势依旧严峻,至今尚无安全有效的疫苗和特效的防治方法。
中药防控病毒性感染有着数千年的临床实践经验[12],除了直接杀灭病毒、抑制病毒复制、阻止病毒致细胞损伤外,还能减轻严重的炎症反应、加强机体对病毒的免疫应答,同时具有毒副作用少、药源丰富、价格低廉及抗毒谱广等优势[13-15]。 中药连翘为中医学中广泛应用的一种清热药,无毒,安全性高[16]。《中华人民共和国药典》记载,连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl 的干燥果实[17]。《本草图经》中记载,连翘味苦,性微寒,归肺、心、小肠经,具有清热解毒、消肿散结、疏散风热等功效,主要的药效物质为连翘酯苷、挥发油、连翘苷等[18]。 田文静等[19]发现连翘水提液抗RSV 活性存在明显的量效关系,而且在不同感染时间给药都能产生抑制作用。借助网络药理学系统地预测连翘抗RSV 的活性成分、潜在靶点、信号通路,并结合体内外实验对连翘不同提取液抗RSV 活性进行初步验证,获得在体内外都有较好抗RSV 效果的连翘提取物,为研发高效抗病毒单体奠定基础。
1 材料
1.1 主要的仪器设备
CKX41 型倒置显微镜(奥特光学仪器有限公司);IL-161CT 型CO2培养箱(施都凯仪器设备有限公司);SB5200DTS 型超声波双频清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司);Allegla X-30R 型全能高速冷冻离心机(美国贝克库曼尔特有限公司);TDL-5-A 型离心机(上海安亭科学仪器厂)。
1.2 药品及主要试剂
连翘经山东省中医药研究院生药教研室鉴定;利巴韦林(批号:J1202A ......
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