刘 勇，易振宇，张信成

    (1.湖南省中西医结合医院医保科，湖南 长沙 410006；2.湖南省中西医结合医院脊柱骨肿瘤科，湖南 长沙 410006；3.湖南省中西医结合医院创伤关节科，湖南 长沙 410006)

    骨质疏松症主要表现为骨量减少、骨微结构破坏，可增加骨折风险，多发于老年人，在绝经后的女性中发病率高达50%，雌激素替代疗法为治疗骨质疏松症的有效措施，但是长期使用可增加乳腺癌的风险[1-2]。 益肾健骨颗粒具有补益肝肾、益气养血、化瘀通络的作用，对芳香化酶抑制剂相关的肌肉骨骼症状具有良好的改善作用[3]。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)可分化为成骨细胞，在维持骨的重建过程中发挥重要作用[4]。 研究显示，健骨颗粒可以调低miR-141 的表达，促进BMSCs 成骨分化[5]。 骨保护素(osteoprotegerin，OPG)/核因子κB 受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B, RANK)/RANK 配体(RANK ligand, RANKL)信号通路在骨吸收与骨形成过程中发挥调控作用，激活OPG/RANKL/RANK 信号通路可抑制破骨细胞的分化和成熟，促进BMSCs细胞成骨分化[6]。 因此，本研究探索肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠BMSCs 成骨分化及OPG/RANK/RANKL 信号通路的影响，以期阐明其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF 级SD 雌性未受孕大鼠(7～8 周龄)，体质量(200±20) g，购自广州中医药大学[生产许可证号：SCXK(粤)2019-0047]。

    1.2 主要材料

    益肾健骨颗粒(批号：20210320，湖南省中医药研究院制剂室)；β-磷酸甘油钠(批号：G9422)、地塞米松磷酸钠注射液(批号：D1576)、茜素红S(批号：A5533)均购自美国Sigma 公司；OPG 小干扰RNA(small interfering RNA-OPG, si-OPG，批号：Z190301)、小干扰RNA 阴性对照(small interfering RNA negative control, si-NC，批号：A20210324)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP，批号：202104085)、Runt 相关转录因子2(Runt-associated transcription factor 2,Runx2 ......