唐丽亚，瞿启睿，吴 霞，龙轶映，许 明，张 泓，刘 琼，艾 坤*，周 璐*

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.长沙医学院，湖南 长沙 410219；3.郴州市第一人民医院，湖南 郴州 423000)

    神经源性膀胱(neurogenic bladder, NB)是脊髓损伤后常见的并发症之一[1]。 膀胱正常的排尿反射由脊髓的交感神经区(T10～L2 脊髓节段)、副交感神经区(S2～S4 脊髓节段)和脑桥等高级中枢共同控制。脊髓损伤后由于炎症反应、胶质细胞增生和氧化应激等继发性损伤，导致神经组织损伤范围进一步扩大，出现胶质瘢痕增生和轴突再生障碍。T10 及以上脊髓损伤后，支配膀胱的交感神经失去脑桥等高级排尿中枢的控制而出现过度兴奋，其支配的膀胱括约肌(膀胱颈)过度收缩，最终导致膀胱颈梗阻和膀胱排尿障碍[2]，继而引起尿液反流和肾功能损伤等一系列泌尿系统问题[3-4]。

    因此，减轻脊髓损伤后的继发性损伤，保护神经组织，抑制T10～L2 脊髓节段交感神经区过度兴奋是治疗脊髓损伤后膀胱颈功能障碍(bladder neck dysfunction, BND)的重要思路之一。 目前，临床上主要通过膀胱颈切开术和注射α 受体阻滞剂来治疗BND，虽然取得一定疗效，但依然存在术后并发症、药物毒副作用等缺陷[5-6]。 因此，从T10～L2 脊髓节段寻找其他潜在的干预靶点来指导治疗脊髓损伤后BND，其临床意义尤为重要。

    TMT 标记定量蛋白质组学技术能更全面地检测出组织中表达的蛋白质，这也为蛋白质组学的应用实现高灵敏度和高深度的蛋白质组覆盖[7]。通过筛选目标组织中的差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs)，并对DEPs 进行生物信息学分析，重点探讨潜在的关键靶点蛋白，能从多个角度探讨疾病的病理机制[8]，有助于挖掘出疾病潜在的临床干预靶点。

    本研究通过横断T10 脊髓节段制备脊髓损伤后BND 模型[9]，使用TMT 标记定量蛋白质组学技术检测T10～L2 脊髓节段的DEPs，再对这些DEPs 进行生物信息学分析，从而寻找新的生物标志物来指导治疗脊髓损伤后BND。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组

    健康成年雌性SD 大鼠40 只，体质量250～280 g，由湖南中医药大学动物实验中心提供，合格证编号：1107271911006889。标准条件下(温度24～26 ℃，湿度50%～70%)分笼饲养于湖南中医药大学动物中心实验室 ......