邹 攀，许红淼，伍永慧，罗 欢，蔺 婷，王贤文，周芳亮，何迎春*

    (1.湖南中医药大学，湖南长沙 410208；2.湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究中心，湖南长沙 410208；3.中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室，湖南 长沙 410208；4.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007)

    鼻咽癌可归属于中医学“失荣”等范畴，明代陈实功《外科正宗》云：“失荣者，其患多生肩之以上，初起微肿，皮色不变……愈久愈大，越溃越坚，犯此俱为不治”。 中医学认为，鼻咽癌的发生为在体内外各种致病因素的影响下，出现气血凝滞或痰浊结聚，以致经络受阻，积聚而成，或痞塞日久，则积聚壅结，郁火化热，火毒内困而成。 古今医家常用清热解毒、软坚散结、益气养阴等治法。 田道法教授团队遵循先贤抗鼻咽癌的宝贵经验自创益气解毒方，以黄连、黄芪固护元气、鼓邪外出，达到“祛邪不伤正”和“邪去正自安”的目的；以党参补益肺气和白花蛇舌草清热解毒、散癌祛毒；天花粉和茯苓健脾养阴、充养其身。全方补泻共用、气阴双补，共奏益气解毒、平和抗毒之效，在临床应用多年并取得良好疗效[1-2]。 中药复方乃复杂物质体系，药效物质基础和作用靶点之间存在错综复杂的网络关系。 分析并揭示这一复杂网络之间的相互关联性，阐明复方中众多药效物质基础及其作用机制，是中医药亟待解决的重大科研任务[3]。 为了探究益气解毒方抗鼻咽癌的潜在作用机制，本研究通过网络药理学方法建立了益气解毒方化学成分-靶点网络，预测益气解毒方治疗鼻咽癌的作用机制，利用体外实验验证益气解毒方水提物及其活性成分槲皮素抑制鼻咽癌细胞增殖的效应及潜在作用靶点和相关通路，为复方及单体抗肿瘤提供更多的证据。

    1 材料

    1.1 细胞株

    人低分化鼻咽癌细胞株CNE-2(批号：BNCC 341794)购买于北京北纳创联生物技术研究所，由中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室传代培养。

    1.2 药物与主要试剂

    益气解毒方(黄芪30 g，茯苓10 g，党参10 g，天花粉10 g，黄连10 g，白花蛇舌草10 g，甘草6 g)，购自湖南中医药大学第一附属医院中药房，水提物具体制备方法参考本课题组前期研究[4]。 顺铂(批号：MKCM2435，美国Sigma 公司)；槲皮素标准品(批号：C28J11Y116820，上海源叶生物科技有限公司)。

    1.3 主要仪器

    恒温水浴箱(型号：BWS-27，中国上海一恒科学仪器有限公司)；高速冷冻离心机(型号：MRZ16A022 ......