针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织铁死亡的影响
过氧化,造模,脂质,1材料与方法,1实验动物及分组,2主要试剂及仪器,3动物造模,4干预方法,5检测指标及方法,6统计学分析,2结果,1各组大鼠神经功能缺损评分比较,2各组大鼠脑梗死面积比较,3各组大鼠海马区RO
汪红娟,唐 红,江姗姗,李展富,吕倩忆,田浩梅,陈楚淘*(湖南中医药大学,湖南 长沙 410208)
脑血管病是严重危害人类生命安全并具有多方面损伤的疾病,国外调查研究指出,缺血性脑卒中(ischemic stroke, IS)占所有脑血管意外疾病的87%[1]。 临床上,针对IS 常通过溶栓治疗恢复缺血侧血液循环,然而IS 发生一段时间后重新获得血液供应时,缺血性损伤有可能不会逆转反而进一步加重,出现更严重的脑组织损伤现象包括神经细胞死亡等,即脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury, CIRI)[2]。 铁死亡是一种特殊的新型细胞死亡方式,与细胞自噬、坏死等其他死亡方式有所区别,它是由于细胞内铁离子、活性氧(reactive oxygen species, ROS)等有关代谢产物过量沉积,出现的脂质过氧化反应[3]。 铁死亡与缺血再灌注损伤、肿瘤、神经退行性疾病和肾功能损伤等许多疾病联系密切[4]。 研究表明,CIRI 后会出现细胞内铁离子水平升高和脂质过氧化物增多,而降低铁离子水平,可改善脑梗死症状、减轻缺血后的神经损伤[5-6]。 前期课题组研究证明,针刺督脉穴“大椎”“人中”“百会”对CIRI 大鼠脑组织具有一定程度的神经保护作用,其机制与多蛋白、多基因、多信号通路抑制细胞凋亡有关[7]。 故针刺是否可通过调节铁离子代谢和脂质过氧化,来抑制神经细胞铁死亡抗CIRI 值得研究。 因此,本研究通过检测大鼠缺血侧海马组织铁离子、ROS 和脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,观察铁沉积情况,阐明针刺对CIRI大鼠的脑保护效应及铁死亡的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
65 只健康SD 大鼠,体质量210~230 g,由湖南中医药大学SPF 级实验动物中心代替购买,合格证号:SCXK(湘)2019-0004。 所有大鼠在湿度50%~60%、温度22~24 ℃、灭菌饲料饮食及纯净水条件下饲养。大鼠普通喂养3 d 后,随机选取20 只作为假手术组,其余进行造模,造模成功后再随机分为模型组、药物组、针刺组,其中药物组5 只,模型组和针刺组各20 只。
1.2 主要试剂及仪器
水合氯醛(批号:B1826028 ......
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