李 玲，谭 洋，汪 涛，张 熙，肖锦仁，李志忠*，裴 刚*

    (1.湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208；2.湖南省普通高等学校中药现代化重点实验室，湖南 长沙 410208；3.湖南省第二人民医院，湖南 长沙 410021；4.古汉中药有限公司，湖南 衡阳 421000)

    巨噬细胞是机体重要的免疫细胞，广泛分布在身体的各个组织中。 在不同的病理条件下，巨噬细胞可极化为促炎的M1 型巨噬细胞(经典活化的巨噬细胞)和抗炎的M2 型巨噬细胞(替代活化的巨噬细胞)[1]。 抑制巨噬细胞炎症因子表达、促进抗炎细胞因子的分泌，能很好地抑制机体炎症反应，对炎症相关的多种疾病起到良好的治疗作用。

    内毒素耐受是指先天免疫细胞(如单核细胞和巨噬细胞)在内毒素[如脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)]长期刺激后，再次接受同类刺激时，细胞炎症反应受到抑制的现象[2]。 内毒素耐受现象存在于多种炎症相关疾病中[3]，被认为是机体受到长期炎症损伤的保护机制。 促进内毒素耐受，能够抑制炎症细胞引发的炎症损伤，对脓毒症等多种炎症疾病起到一定的治疗作用。

    乌头酸脱羧酶1(aconitate decarboxylase 1, IRG1)是炎症和感染中免疫代谢的调节因子，在炎症反应、抗菌过程、肿瘤、神经退行性改变等病理状态下，均发现IRG1 的表达上调[4-6]。 巨噬细胞在病原体相关分子模式(如LPS)、细胞因子(如TNF-α 和IFN-γ)等的刺激下高表达IRG1[7]。 研究表明，IRG1 可以通过催化衣康酸在巨噬细胞中的积累，抑制LPS 刺激所导致的氧化应激促进细胞的抗炎表型[8]。 此外，IRG1 催化产生的衣康酸，可抑制琥珀酸脱氢酶的活性，增加琥珀酸的积累，这在巨噬细胞代谢重塑中发挥着重要作用[9]。 但是，尚未有关IRG1 对内毒素耐受作用的相关研究报道。

    熊果酸(ursolic acid, UA)和坡膜酸(pomolic acid,PA)均属于乌苏烷型五环三萜，有多篇文献报道了这两个化合物在抑制巨噬细胞炎症反应方面的活性[10-11]。本研究旨在通过体外实验研究IRG1 对巨噬细胞内毒素耐受的调控，及UA 和PA 的干预作用。

    1 材料与方法

    1.1 细胞培养

    实验所用小鼠RAW264.7 单核-巨噬细胞系(191220)购自中国科学院细胞库 ......