肖玉洁，黄立中，龚 辉，戴新军，朱 旭，冯 磊，王 婷

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.湖南省中医药研究院附属医院，湖南 长沙 410006；3.株洲市中心医院，湖南 株洲 412007)

    三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)是乳腺癌中最具侵袭性的亚型，缺乏内分泌治疗及靶向治疗药物，预后差[1]。 乳腺癌干细胞的自我更新分化是乳腺癌发生和复发的重要机制，参与调控乳腺癌的侵袭转移、对放化疗的治疗抵抗[2]。 乳腺癌干细胞常位于肿瘤的缺氧区域，低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1，HIF-1α)是调节氧稳态的核转录因子，缺氧环境下TNBC 细胞中乳腺癌干细胞比例的增加归因于HIF-1α 的激活，且HIF-1α 的激活与TNBC 的转移率和死亡率增加有关[3]。 HIF-1α 调节70 多个基因，如血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶、白血病-2 基因等，调控恶性肿瘤的细胞增殖、血管生成、侵袭和转移[4]。本课题组前期实验结果显示，缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231 的HIF-1α、胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor, IGF-Ⅱ)、L-选择素(L-selectin)表达上调[5]。

    TNBC 归属于中医学“乳岩”范畴，肝郁气滞，瘀毒互结是主要病因病机，癌毒乃痰浊、瘀血等病理产物阻于乳络，蕴结不解，日久而生，癌毒是乳腺癌发生发展的关键，抗癌解毒是重要治则[6]。 清热解毒中药黄芩为治疗乳腺癌的常用药，黄芩苷是黄芩的主要活性成分，黄芩苷能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和侵袭转移[7]。本研究从HIF-1α 信号通路研究黄芩苷对缺氧乳腺癌干细胞增殖的抑制效应及作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞系

    人乳腺癌细胞株MDA-MB-231(青旗生物技术发展有限公司，批号：BFN608008564)，悬浮培养分离出乳腺癌干细胞微球体MDA-MB-231[5]。

    1.2 主要试剂

    黄芩苷(北京索莱宝科技有限公司，批号：SB8020)；HIF-1α 抑制剂2-ME(美国MCE 公司，批号：JH1838)；顺铂(cisplatin，DDP)注射液(云南生物谷灯盏花药业有限公司，批号：20160326)；胎牛血清(美国Gibco 公司，批号：10091-148)；B27 培养基(美国Thermo Fisher Scientific 公司 ......