电针心经/心包经穴对MCAO/R 大鼠MeCP2磷酸化影响的研究
1材料与方法,1实验动物及分组,2主要仪器和试剂,3大鼠MCAO,R模型的建立,4干预方法,5检测指标及方法,6统计学分析,2结果,1各组大鼠神经功能缺损评分的比较,2各组大鼠脑梗死体积百分比的
潘 江,曹 洋,2,陈 成,李赛群,章 薇*(1.湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007;2.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208)
脑缺血损伤后神经功能的重建与修复一直以来都是医学领域的研究热点[1],其中突触可塑性是脑缺血损伤后康复的主要机制之一[2]。 DNA 甲基化通过甲基化CpG 结合蛋白2(methyl CpG binding protein 2, MeCP2)磷酸化修饰途径调控目标基因的表达变化,在神经干细胞的自我更新、分化、可塑性调节中发挥关键作用[3]。 相关研究证实,MeCP2 磷酸化修饰及其信号途径参与了脑缺血损伤后神经细胞的分化与调节[4]。 针刺作为脑缺血疾病的一种重要的防治手段,被广泛应用于脑缺血疾病的不同临床时期,并取得了良好的疗效[5-8]。 本课题组前期研究发现,电针心经/心包经穴可以诱导神经营养因子(nerve growth factor, NGF)的释放[9],但其效应过程尚不明确。根据MeCP2 磷酸化修饰途径在诱导神经细胞特异性基因表达,促进NGF 释放、树突发生和棘突成熟等方面发挥的重要作用[10]。 本研究通过观察电针心经/心包经穴对中动脉先闭塞再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion, MCAO/R)大鼠神经功能缺损以及脑组织中MeCP2 磷酸化修饰变化的影响,验证电针心经/心包经穴改善脑缺血损伤的作用与MeCP2 磷酸化修饰途径密切相关,为“从心治脑”以及经穴特异性提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
健康雄性SPF 级SD 大鼠200 只,体质量250~350 g,由湖南中医药大学实验动物中心提供,合格证号为SCXK(湘)2016-0002。所有动物均在SPF 级动物房喂养,自由摄食与饮水,饲养温度为20~25 ℃,湿度为40%~60%。 本实验所有操作都通过了湖南中医药大学动物实验伦理要求(伦理审批号:ZYFY20160513),并严格遵照中华人民共和国科技部2006 年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》中有关动物的使用及伦理学规定。
运用随机数字表法将200 只大鼠分为正常组(40 只)、假手术组(40 只)、造模组(120 只)。 造模后随机将120 只造模组大鼠分为模型组、心经穴组、心包经穴组,每组40 只;再随机将各组分为1 d、7 d、14 d、21 d 亚组,每亚组10 只。
1.2 主要仪器和试剂 ......
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