曾志成，李银鑫，秦惠钰，蒋鹏飞，彭 俊*，彭清华*

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.湖南桂阳县第一人民医院，湖南 郴州 424400；3.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007)

    青光眼是一组以视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)进行性凋亡及视神经纤维的丢失为特征的神经退行性疾病[1]。 目前，对于青光眼的治疗以降低眼压为主，但即使控制眼压仍不能完全阻止青光眼患者视神经的持续性损伤和退行性改变[2]。 本团队前期研究发现，青光安Ⅱ号方对眼压已控制的青光眼患者的视神经能起到一定的保护作用[3]，并通过高通量筛选体系多模式(水提醇提-溶剂分配分离-大孔树脂) 提取分离手段得到了青光安Ⅱ号方的有效组分[4]。 为明确青光安Ⅱ号方有效组分对青光眼视神经的保护作用及机制，本研究将青光安Ⅱ号方有效组分配制成低、中、高3 种梯度剂量作用于青光眼模型DBA/2J 小鼠，以验证其是否具有抑制RGCs 凋亡、保护视神经的作用，同时对其保护视神经的机制进行探讨。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 60 只10 周龄SPF 级DBA/2J 小鼠，雌性，体质量18～22 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，实验动物许可证号：SCXK(京)2016-0006，质量合格证号：No.1100111911055898；20 只10 周龄SPF 级野生型C57BL/6J 小鼠，雌性，体质量18～22 g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，实验动物许可证号：SCXK(湘)2016-0002，质量合格证号：1107271911002463。动物饲养于湖南中医药大学科技创新中心实验动物中心屏障环境实验室，实验动物使用许可证号：SCXK(湘)：2019-0009，饲养过程维持相同实验条件，光/暗周期为12 h/12 h(光照时间6:00～18:00)，背景噪声为(40±10) db，温度(23±3) ℃，动物饲料为标准化颗粒饲料，动物自由进食、进水。 动物饲养和实验操作遵循美国视觉和眼科研究学会(Association for Reearch in Vision and Ophthalmology, ARVO)和湖南中医药大学制定的科研动物和实验室使用规范。实验经湖南中医药大学动物实验伦理委员会批准(LL2019100802)。

    1.1.2 实验药物 青光安Ⅱ号汤剂由枸杞子、黄芪、女贞子等道地药材按规定比例用灭菌蒸馏水制成悬混液；基于团队前期中药高通量筛选体系[5-6]对青光安Ⅱ号方中药组分库的筛选 ......