胡玉蝶，王晓丽，焦方敏，杨 争，袁 博，胡金辉*

    1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007

    乳腺癌是我国女性发病率最高的恶性肿瘤疾病[1-2]，其主要死亡原因是远处转移的发生，骨骼是该病最常见的转移部位，发生率高达70%～85%[3-4]，临床症状多为局部或全身疼痛、病理性骨折、高钙血症等，严重影响患者生活质量[5]。 目前，西医主要治疗方法有骨改良药物的应用、抗肿瘤治疗、手术治疗、镇痛治疗等，但毒副作用较多且疗效有限[6]。 近年来，中医药基于辨证论治、因人制宜的特点，在防治乳腺癌骨转移中取得良好疗效，临床上越来越多的患者选择中西医结合疗法防治乳腺癌骨转移[7]。补肾活血汤出自《伤科大成》，乃治疗乳腺癌骨转移临床常用方[8-9]，本研究利用网络药理学预测补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移的作用靶点，并行实验验证，旨在揭示补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移的内在分子机制，为其临床进一步应用提供科学依据。

    1 材料

    1.1 动物与细胞

    15 只健康BALB/c 6～8 周龄雌性裸鼠，饲养于湖南中医药大学动物中心实验室，饲养温度24～26 ℃，湿度为50%～70%，许可证号：SYCK(湘)2020-0038。乳腺癌4T1-luc 细胞株(批号：CL-0007)购自普诺赛公司，本实验已通过湖南中医药大学实验动物伦理委员会，批准编号：LL2021041404。

    1.2 主要药品与试剂

    Src 抗体(批号：ab109381)、MMP1 抗体(批号：ab52631)均购自英国Abcam 公司；VEGF 抗体(批号：13687-1-AP)、内参β-肌动蛋白(β-actin)(批号：66009-1-Ig)、NFATc1 抗体 (批号：66963-1-Ig)、HRP goat anti-rabbit IgG(批号：SA00001-2)、HRP goat anti-mouse IgG(批号：SA00001-1)均购自美国proteintech 公司。

    补肾活血汤药物组成：熟地黄12 g(批号：2106031)、杜仲15 g(批号：21050406)、枸杞子15 g(批号：HH21050701)、补骨脂15 g(批号：HY21051901)、菟丝子15 g(批号：CK21042906)、当归尾12 g(批号：TH2105702)、没药6 g(批号：21051901)、山茱萸15 g(批号：SX21052806)、红花6 g(批号：SX21051301)、独活15 g(批号：TH21052606)、肉苁蓉15 g(批号：2105245) ......