周竞颖，来奕恬，丁攀婷，张国山*，刘 密*

    1.湖南中医药大学研究生院，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学针灸推拿与康复学院，湖南 长沙 410208

    克罗恩病(Crohn's disease, CD)是一种慢性炎症性疾病，可能发生于口腔到肛门中的任意一段消化道。 近年来，我国发病人群不断增多，首发症状包括腹痛、慢性腹泻、瘘管形成和肛周病变等，且通常伴有肠外症状，严重影响患者的生活质量[1-2]。 由于先天性免疫和获得性免疫失调，CD 易反复发作，需要长期的药物维持治疗，目前仍无特异性疗法。针灸作为中医传统疗法，具有温通经络、行气活血、补虚抗邪等功效，在肠道疾病临床治疗中使用广泛，取得了良好的治疗效果[3]。 根据CD 的临床症状特点，中医辨证其病位在肠，而天枢穴是大肠的募穴，作为肠腑病症的常用穴位[4]。 皮肤作为感受针灸刺激的首个环节，可能是其发挥疗效的首要部位，穴位存在于体表，而体表皮肤中密集分布着神经纤维，它们可以释放不同类型的神经肽，与全身的免疫细胞群进行交流[5]。 故研究针刺与艾灸启动初始阶段的效应，可通过观察局部穴区组织神经肽的变化来加以分析。因此，本研究通过观察天枢穴局部皮肤中缓激肽(bradykinin, BK)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptid, CGRP)、神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的蛋白表达水平变化，探讨针灸治疗CD 在初始启动环节对腧穴局部皮肤的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物及分组

    清洁级SD 雄性大鼠50 只，体质量为150～180 g，由厦门大学实验研究动物管理中心提供，实验动物许可号：SYXK(闽)1216-0006。 饲养于厦门大学实验动物中心，饲养室温度控制在18～26 ℃，湿度控制在40%～70%，昼夜交替周期为12 h。 大鼠自由进食进水，适应性饲养7 d 后，完全随机分成正常组、模型组、针刺组、艾灸组和西药组，每组10 只。 实验研究过程中进行的操作和处理方式符合《关于善待实验动物的指导性意见》规定。

    1.2 主要试剂及仪器

    2，4，6-三硝基苯磺酸溶液(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid, TNBS)(上海Sigma Alrdich 公司，批号：762229)；Western blot 试剂盒(武汉默沙克公司，批号：BA23387)；ELISA 试剂盒(武汉贝莱茵生物科技公司，批号：RA21360)；BA110S 万分之一电子天平(德国Sartorius 公司 ......