槲皮素对自然流产小鼠模型母胎免疫耐受的影响
蜕膜,低浓度,1材料,1药物与主要试剂,2主要仪器,2方法,1实验动物,2模型制备,分组及干预方法,3检测指标及方法,4统计学方法,3结果,1各组小鼠流产率比较,2各组小鼠子宫蜕膜组织病理比较,3各组小鼠血清IFN-
黄长盛,辛兴涛,贺守第,谭 宁*1.华中科技大学协和深圳医院中医风湿科,广东 深圳 518000;2.河北省第八人民医院普外科,河北 石家庄 050011
自然流产(spontaneous abortion, SA)是妇科常见生殖功能障碍疾病。 据目前不完全统计,SA 的发病率为2%~4%[1],并且具有反复发作的特点。 SA 严重影响妇女的身心健康,也关系到人类种族繁衍,因此,研究其防治的方法具有较大的临床和社会意义。成功的妊娠是母体免疫系统识别和耐受胚胎的种植过程。研究发现,SA 与母胎界面免疫耐受相关,母胎界面免疫受损是导致SA 的重要环节之一[2]。 提高母胎界面的免疫耐受性是近年来治疗SA 的研究热点,研究新的药物对母胎界面的免疫耐受性的影响,是治疗SA 的重要方向。
本团队前期研究表明,补肾复方减味寿胎丸能减少SA 动物模型的流产率,菟丝子是该方最重要的药物[3]。 研究表明,槲皮素是菟丝子黄酮中具有类雌激素活性的重要成分[4],菟丝子黄酮和其主要成分槲皮素对SA 具有有效治疗作用[3],槲皮素对妊娠大鼠调节母胎界面免疫耐受的T 淋巴细胞亚群有改善作用[5],但槲皮素是否对SA 动物模型具有免疫调节作用尚未见系统研究。 地屈孕酮是一种治疗先兆流产的孕激素,可降低子宫平滑肌兴奋性,抑制子宫收缩,促进胚胎正常发育[6]。因此,本文研究槲皮素对SA 动物模型免疫调节的影响,从母胎免疫耐受调节的角度进一步阐明槲皮素治疗SA 的免疫机制。
1 材料
1.1 药物与主要试剂
槲皮素(美国Sigma 公司,批号:117-39-5);荧光 素 标 记-抗 小 鼠CD56、CD16、CD19、CD5、CD4、CD8、CD3 荧光抗体(美国Ebioscience 公司,批号:21-0125-62、24-0175-61、06-0028-13、58-0164-21、21-0125-62、12-0040-68、12-0102-18);小鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)(北京四正柏公司,批号:BBMS7262、MS7267、MS5424);雌二醇(estradiol, E2)、孕酮(pro gesterone, P)ELISA 试剂盒(上海纪宁生物有限公司,批号:42348-14-6、60241-11-2)。
1.2 主要仪器 ......
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