象皮生肌膏预处理的骨髓间充质干细胞源外泌体对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响
批号,伤口,1材料,1细胞,2主要药物与试剂,3主要仪器,2方法,1XPSJO溶液的制备,2细胞的培养与预处理,3Exos的提取及形态观察,4Westernblot检测Exos标志物蛋
刘 颖,尹园缘,邹巍莹,曹 晖,宾东华*1.湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007;2.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208
伤口修复自古以来都是临床工作中的一大难题。目前,因创伤、手术、慢性疾病等所导致的皮肤伤口给患者、家庭及社会带来了生理、心理、医疗及经济等方面的沉重负担。因此,寻求有效的方法以促进伤口快速地愈合尤为重要。 新血管的生成在伤口愈合的过程中发挥重要作用[1]。 新生的血管可运送营养物质、氧气及生长因子至损伤的组织,并带走相关代谢产物,从而加速伤口愈合。 因此,刺激血管生成是促进创面愈合的有效策略。 近年来,外泌体(exosomes, Exos)作为一种无细胞疗法,避免了干细胞治疗的免疫排斥、致瘤、栓塞等缺点,以其较高的安全性及稳定性和更强大的组织再生潜能,已成为促进伤口愈合的研究热点[2]。 研究表明,间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)来源的Exos 可加速组织修复的新生血管形成和提高再生能力,对多种类型的皮肤组织损伤具有强大的修复作用[3-4]。MSC 来源的Exos 可通过携载诸多生物活性分子,作用于内皮细胞,促进其增殖、迁移和成管,从而调节血管生成过程,加速伤口的愈合[5-6]。
象皮生肌膏(Xiangpi Shengji Ointment, XPSJO)出自张山雷的《疡科纲要》,湖南中医药大学第一附属医院药物制剂中心在其原方基础上进一步化裁,并结合现代制备工艺制作成中医外科常用膏剂,具有清热解毒、活血化瘀、祛腐生肌之功效,在湖南中医药大学第一附属医院外科临床广泛应用,生肌效果显著。 已有证据表明,预处理可增强MSC 的生物学功能,增强Exos 活性,从而提高创面修复效果[7-10]。目前,XPSJO 结合Exos 的研究未见报道。 因此,本研究以血管新生为切入点,探讨经XPSJO 预处理骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)后提取的外泌体(XPSJO-Exos)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)的影响,分析XPSJO-Exos 作为“非细胞治疗”方法在促伤口愈合治疗中的潜力,为XPSJO 促伤口愈合提供实验证据,并为临床促伤口愈合的治疗提供新思路。
1 材料
1.1 细胞
BMSC 购自广州赛业生物科技有限公司,批号:HUXMA-01001。 HUVEC 购自中国科学院细胞库 ......
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