张海英 王晖 潘佳俊 高海波 赵欣然 刘春燕 唐群

    〔摘要〕 目的 觀察六味地黄汤(Liuwei Dihuang Decoction， LWDHD)调控miR-210/HIF-1α信号通路对CoCl2诱导的HK-2细胞上皮间质转化(epithelial mesenchymal transdifferentiation， EMT)的作用和机制。方法 体外培养HK-2细胞，分对照组(N组)、模型组(M组)、LWDHD血清组(LW组)、空白血清+miR-210过表达组(LV-miR-210组)、空白血清+miR-210沉默组(LV-anti-miR-210组)、空白血清+miR-210阴性对照组(LV-miR-210 NC组)、LWDHD血清+miR-210过表达组(LW+LV-miR-210组)、LWDHD血清+miR-210沉默组(LW+LV-anti-miR-210组)、LWDHD血清+miR-210阴性对照组(LW+LV-miR-210 NC组)，除N组外，其他各组加入CoCl2处理。CCK-8法检测不同浓度LWDHD、CoCl2在24 h后对HK-2细胞活性的影响并选择最佳干预浓度。细胞免疫荧光和Western blot法检测各组HK-2细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α， HIF-1α)、β-联蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏素(E-cadherin)蛋白表达情况；qPCR法检测miR-210、HIF-1α、β-catenin、Vimentin mRNA表达情况。通过慢病毒感染HK-2细胞，实现miR-210的过表达和抑制，并加入CoCl2，观察miR-210、HIF-1α、β-catenin、Vimentin蛋白和mRNA表达以及LWDHD的干预作用 ......