骆慧婷 欧阳威 王旭易 颜红 陈姿延 吴慧 李涛 肖丹

    〔摘要〕 目的 制备叶酸修饰蟾毒灵阳离子脂质体(FA-BF-CLs)，并对其进行质量评价及抗肝癌研究。方法 采用薄膜-超声分散法制备FA-BF-CLs，以粒径、Zeta电位及包封率等为指标，采用单因素和Box-Behnken响应面分析法对处方及工艺进行优化。透射电镜观察脂质体显微形态，并考察其体外释放过程、溶血性及空白阳离子脂质体体外细胞安全性。采用CCK-8法比较FA-BF-CLs、BF-CLs(未加叶酸修饰的蟾毒灵阳离子脂质体)及BF-solution(蟾毒靈溶液)的体外细胞毒性。结果 最佳条件为磷脂与药物质量比14.17∶1、磷脂与胆固醇质量比3.8∶1、超声时间13 min，制备得到脂质体粒径(135.5±1.40) nm，多分散系数0.192±0.025，Zeta电位(16.23±0.46) mV，包封率69.42%±2.18%。体外释放研究表明，FA-BF-CLs具有明显的缓释效果，溶血试验结果显示该载体材料无溶血现象。体外细胞安全性结果显示阳离子脂质体浓度在0～20 μmol/L范围内安全无毒。体外细胞毒性表明FA-BF-CLs对HepG2肝癌细胞的抑制作用大于BF-CLs和BF-solution(P1)、磷脂与胆固醇质量比(X₂)、超声时间(X₃)，以包封率(Y)作为评价指标进行实验。实验设计与结果见表1—2。

    2.5.2? ?模型拟合及方差分析? 采用Design-Expert V12.0 软件，以包封率(Y)对X₁、X₂、X₃进行二次项式回归方程拟合。回归方程为：Y=68.19-1.72X₁-2.95X₂-4.45X₃+2.73X₁X₂+2.27X₁X₃-3.47X₂2X₃-9.25 X₁²-5.62X₂²-5.70X₃² ......