壮骨止痛胶囊对去卵巢致骨质疏松大鼠肠道微生态的影响
厚壁,菌门,结肠,1材料和方法,1实验动物,2主要试剂和仪器,3分组及给药,4HE染色,5ELISA法检测血清IL-17,TGF-β,LPS表达,6RT-PCR法检测结肠Occludin,ZO-1mRNA表达
张天慧,刘 婷,雷晓明,王 舒,王丰林,刘平安*,张国民*湖南中医药大学中西医结合学院,湖南 长沙 410208
绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)是一种常发生于女性绝经后5~10 年内的骨科疾病,由于卵巢功能的下降,雌激素大幅度下降,导致成骨细胞和破骨细胞的动态平衡受到影响,继而结构和功能发生紊乱,表现为骨痛、易骨折[1]。 目前,临床中采取的药物治疗,长期服用易产生耐药性和许多不良反应,因此,亟须寻找更加安全可靠的治疗方式[2]。 中医药优势在于资源丰富、药效理想、不良反应少,可通过调控骨代谢相关信号通路及骨骼相关细胞的增殖分化等来治疗骨代谢紊乱导致的PMOP,进而维护骨骼健康[3]。 越来越多的研究表明,中医药对骨代谢的调控作用可能与肠道菌群有关,但其具体机制仍需进一步探讨[4]。 因此,本研究以去卵巢(ovariectomised, OVX)大鼠为研究对象,探索壮骨止痛胶囊(Zhuanggu Zhitong Capsule, ZGZTC)对OVX 所致骨质疏松症(osteoporosis, OP)大鼠肠道菌群结构与多样性的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物
2 月龄SPF 级SD 雌性大鼠40 只,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司[许可证号:SCXK(湘)2019-0009],于湖南中医药大学动物实验中心饲养,选用无菌颗粒饲料饲养,自由饮水,环境温度20~25 ℃,室内通风良好。适应性喂养1 周后进行实验。操作均符合实验动物伦理学要求,并通过湖南中医药大学实验动物中心伦理审查(伦理号:LL2022110903)。
1.2 主要试剂和仪器
ZGZTC 由补骨脂、淫羊藿、枸杞子、女贞子、骨碎补(烫)、狗脊、川牛膝组成(0.45 g/粒,四川美大康药业股份有限公司,国药准字:Z20050118,批号:220703);戊酸雌二醇(estradiol valerate, EV)片(1 mg/片,拜耳医药保健有限公司广州分公司,国药准字:J20171038,批号:699A);脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)ELISA 试剂盒(厦门仑昌硕生物科技有限公司,批号:YD-31044、YD-30201、YD-31073);大鼠GAPDH内参引物(生工生物工程股份有限公司 ......
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