基于HPLC 和LC-Orbitrap-MS 的栀子化学成分定性与定量研究
红花,批号,1材料,1试剂,2药材,3主要仪器,2方法与结果,1色谱与质谱条件,2对照品溶液制备,3样品溶液制备,4特征图谱建立,5含量测定,6LC-Orbitrap-MS分析,3讨论
袁汉文,李云耀*,梁 玲,吕梦颖,王 炜*1.湖南中医药大学中医药民族医药国际联合实验室,湖南 长沙 410208;2.湖南交通工程学院,湖南 衡阳 421001
中药栀子(Gardeniae Fructus)为茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis)的成熟果实,习称山栀子。栀子为清热泻火药,具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒等功效,常用于热病心烦、湿热黄疸等疾病[1]。研究表明,栀子中主要成分为环烯醚萜类,如京平尼苷(Geniposide)、山栀苷(Shanzhiside)、羟异栀子苷(Gardenoside)等[2]。 此外,栀子中还含有大量的二萜类化合物,如西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、西红花苷Ⅲ等[3]。 栀子具有保肝利胆、抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血脂、抗病原微生物等多种药理作用[4]。 栀子苷被认为是栀子的主要有效成分,在2020 版《中华人民共和国药典》 中,TLC 鉴别主要检测其是否存在栀子苷,HPLC 含量测定规定栀子中栀子苷的含量以干燥品计,不得低于1.8%[1]。 大花栀子(Gardenia jasminoides Eills var.grandiflora Nakai)为栀子的变种,其果实习称水栀子,外形较中药栀子略大,化学成分与中药栀子高度相似,但历来不作药用,是中药栀子最常见的混淆品[5]。
本研究利用HPLC 双波长法对栀子中的主要成分进行了分析,建立了栀子特征图谱,并通过与对照品溶液进行比较鉴定了11 个主要成分。 PCA 和PLS-DA 分析结果表明,山栀子和水栀子主要的化学成分没有明显差异。 此外,本研究还建立了6 个主要成分的含量测定方法,并利用LC-Orbitrap-MS技术从栀子中鉴定了31 个成分。
1 材料
1.1 试剂
HPLC 级甲醇(批号:WXBD9351V)和乙腈(批号:WXBF0117V)购自美国Sigama Aldrich 公司,其他分析纯试剂均购自国药集团化学试剂有限公司(中国上海) ......
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