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编号:2216564
基于JNK通路探讨补肾活血方对大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡的影响
http://www.100md.com 2024年9月30日 湖南中医药大学学报 2024年第9期
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    〔摘要〕 目的 探讨补肾活血方(Bushen Huoxue Formula, BSHXF)通过c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)信号通路对大鼠骨关节炎(Osteoarthritis, OA)软骨细胞凋亡的影响。方法 采用白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)诱导体外分离培养的大鼠软骨细胞构建体外OA模型,并使用不同浓度的BSHXF干预处理。使用MTT法测定细胞活力;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术评估细胞凋亡情况;Western bolt检测凋亡相关蛋白裂解的胱天蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma 2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)水平和JNK、磷酸化c-Jun 氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase, p-JNK)蛋白水平。试剂盒检测细胞中活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽(Glutathione, GSH)水平;ELISA法检测细胞上清液中促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)含量。结果 (1)与对照组相比,模型组软骨细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.01);模型组Cleaved Caspase-3、Bax、p-JNK蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组相比,BSHXF治疗组软骨细胞活力升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.01);BSHXF治疗组Cleaved Caspase-3、Bax、p-JNK蛋白表达水平显著降低(P<0.01) ......

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