[摘要]目的探讨补骨生髓方(BGSSD)含药血清通过缺氧诱导因子- -1α(HIF-1α) 介导MC3T3-E1细胞有氧糖酵解过程对成骨分化的影响。方法 选取18只SD大鼠随机分为含药血清组和空白血清组，各9只。含药血清组按生药量 5.87g/(kg?d) 给予BGSSD药液灌胃，空白血清组给予 20mL/(kg?d) 蒸馏水灌胃，连续灌胃9次后收集腹主动脉血液，获取BGSSD含药血清和空白血清。将MC3T3-E1细胞分为空白血清组、含药血清组和有氧糖酵解抑制剂组，并将HIF- ?1α∝ 慢病毒转染稳定的MC3T3-E1细胞作为SiRNAHIF- ?1α 组。空白血清组加入含 20% 空白血清的 α? -MEM培养基，含药血清组和SiRNA HIF- ?1α 组均加入含 20% BGSSD含药血清的 α? -MEM培养基，有氧糖酵解抑制剂组加入含 20% BGSSD含药血清和 8mmol/L 抑制剂2-脱氧葡萄糖的 ∝ -MEM培养基。采用碱性磷酸酶(ALP)染色法观察4组培养7d后的黑色沉淀物情况;ELISA检测培养 ^48h 后细胞上清液中ALP和丙酮酸(PA)乳酸(LA)的含量;qRT-PCR和Westernblot检测培养 ^48h 后细胞HIF-1α、Runt相关转录因子2(RUNX2)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)mRNA相对表达水平和蛋白表达量。结果与空白血清组比较，含药血清组的黑色沉淀物明显增加、颜色加深，ALP，LA、PA含量均升高( Plt;0.05) ，PDK1、RUNX2、HIF- ?1αα mRNA相对表达水平和蛋白表达量均升高( Plt;0.05 。与含药血清组比较，SiRNAHIF- 组和有氧糖酵解抑制剂组的黑色沉淀物减少、颜色变浅，ALP、LA及PA含量均降低( ......