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编号:2324183
基于PINK1/Parkin通路探讨温阳解毒化瘀方含药血浆对肝细胞损伤的影响
http://www.100md.com 2025年6月26日 湖南中医药大学学报 2025年第5期
    

    [摘要]目的 基于PTEN诱导激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(Parkin)通路探讨温阳解毒化瘀方含药血浆对肝细胞损伤的影响。方法采用D-氨基半乳糖 (D-GalN)+ 脂多糖(LPS)构建肝细胞损伤模型,实验设置对照组、模型组、空白血浆组、中药血浆组、3-MA组、中药 +3-MA 组。CCK-8法筛选含药血浆最佳干预浓度及时间;AnnexinV-APC/PI双染色法检测细胞凋亡情况;JC-1染色检测线粒体膜电位;MitoSOXRed染色检测活性氧(ROS)水平;生物化学法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;透射电镜观察肝细胞超微结构;RT-qPCR法检测PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、螯合体 1(SQSTM1/P62)mRNA 水平;Westernblot法检测PINK1、Parkin、LC3、P62、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白( (Bax) 、裂解的胱天蛋白酶-3(cleaved-Cas-pase-3)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平 ......

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