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编号:2448336
基于miR-96/RECK信号通路探讨南蛇藤总萜对食管鳞癌细胞增殖、侵袭的作用机制
http://www.100md.com 2025年7月1日 湖南中医药大学学报 2025年第6期
    

    [摘要]目的探讨南蛇藤总萜(TTC)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和侵袭的影响,并研究其是否通过调控 *miR-96/ 回复引导半胱氨酸丰富蛋白含Kazal基元基因(RECK)通路实现。方法 选取人ESCC 细胞系KYSE410为研究对象。将KYSE410细胞分为8组,每组设置3个复孔: Ctrl 组(无药物处理)L-TTC组 (40μg/mL 的 TTC处理 24h ) ?M -TTC组( 80μg/mL 的 TTC处理 24h )、H-TTC组( 160μg/mL 的TTC处理 24h )、miR-96NC组(转染阴性对照) 组(转染阴性对照,并用 160μg/mL 的TTC处理 24h )miR-96mimic组(转染 miR-96mimic )和miR-96mimic+TTC组(转染 miR-96mimic ,并用 160μg/mL 的TTC处理 24h )。MTT检测TTC对ESCC细胞活力的影响。平板克隆实验、细胞划痕以及Transwell实验检测KYSE410细胞增殖、迁移和侵袭能力。RT-qPCR 检测 miR-96表达水平。Western blot检测具有Kazal基序的逆转诱导RECK、基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-2蛋白表达水平。结果KYSE410细胞经 20.40,80,160μg/mL 的TTC处理后,可显著抑制其细胞活力,并呈剂量依赖性( Plt; 0.05)。与Ctrl组相比,L-TTC组、M-TTC组和H-TTC组的细胞克隆数、穿膜细胞数和细胞迁移率及miR-96mRNA、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平均显著降低( Plt;0.05 ),RECK蛋白表达水平显著增加 (Plt;0.05) ,呈剂量依赖性。与miR-96NC组相比, miR-96NC+ TTC 组的miR-96mRNA表达水平、细胞克隆数、细胞迁移率和穿膜细胞数及MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低 (Plt;0.05) ......

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