利春叶 吴丽妮 朱肖奇 王爱琴 贾赛雄

    (南方医科大学附属深圳宝安医院 广东深圳 518101)

    1 动物实验材料、方法

    1.1 实验动物

    材料及仪器:新西兰大白兔90只,雌雄不限,5～7周龄,体重2.5kg左右,其中3只用于提供BMCS以及关节滑液来源,其余用于研究防止肌腱粘连。

    1.2 研究方法

    MSCs的诱导分化:将MSCs移入含地塞米松1×10-7mol/L、关节滑液1×10-7mol/L、bFGF-23ng/mL、维生素C100mg/L的胎牛血清DMEM,诱导MSCs向滑膜细胞分化,通过离心、纯化后鉴定(光镜、透射电镜以及免疫组化等鉴定)。然后培养扩增备用。

    滑膜样细胞移植:选用84只大白兔,每只兔的右后肢作为实验组,左后肢为对照组。将诱导分化的细胞悬液移植入大白兔右后肢损伤的跟腱处,术后用管形石膏将下肢固定于膝关节屈曲15°,踝关节背伸l5°,足趾自然位。

    检测指标:术后l、2、4、8周取材。第1周每组各3只动物6条跟腱进行大体标本粘连等级评定、组织学观察(包括光镜和透射电镜观察);后3周每组各6只动物12条跟腱,随机取6条跟腱进行生物力学测试,6条进行大体标本粘连等级评定及组织学观察 ......