GSTθ转染对宫颈癌HeLa细胞侵袭性的影响
母细胞,划痕,图象,1材料与方法,2方法,2结果,1GSTθ高表达HeLa稳定转染细胞的建立,2GSTθ高表达降低HeLa细胞的生长,3GSTθ高表达降低HeLa细胞侵袭转移能力,3讨论
乔惠萍 李启民 陈鹏(包头医学院第一附属医院放疗科 内蒙古包头 014010)
谷胱甘肽S-转移酶是超基因家族酶,为细胞解毒系统的重要成分,可能保护细胞免受活性氧代谢产物损伤的物质[1~3]。人类GSTθ存在着基因的多态性,如20%的高加索人和80%的亚洲人缺少这种酶。正因为GSTθ的多态性,有可能影响到人类发生暴露相关肿瘤的危险性。GSTθ空白基因型在宫颈癌病人非常常见,在年轻宫颈癌病人的发生较60岁以上病人中更常见。而且,GSTθ空白基因型与低分化肿瘤的相关性更强,这表明携带这种基因的个体对宫颈癌有较高的遗传易感性[5]。
在本研究中通过将GSTθ基因,稳定地转染到了人类宫颈癌HeLa细胞,并观察了转染后GSTθ高水平表达对细胞生长及细胞侵袭能力的影响,以了解GSTθ基因改变可能对肿瘤细胞的生物学作用,从而为GSTθ基因作为肿瘤抑制基因为肿瘤基因治疗提供实验基础和依据。
1 材料与方法
1.1 材料
人类宫颈癌HeLa细胞株购自美国ATCC菌种保藏中心,新生小牛血清(美国Gibco),DMEM冻干粉(美国Gibco),MTT(普飞生物科技公司),DMSO(国药集团),酶标仪(Bio-TEK公司),CKX41倒置显微镜、C-7070数码相机(OLYMPUS),pcDNA3(美国Invitrogen公司),Lipofectamine(美国Invitrogen公司),Trizol(加拿大Bio Basic公司),逆转录试剂盒(加拿大Bio Basic公司),PCR扩增试剂剂盒(上海生工)。

图1 HeLa细胞在GSTθ表达 ......
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