基于DNA条形码(ITS2)的绞股蓝与其混伪品的分子鉴定方法分析
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[摘要] 目的 探讨基于ITS2序列的绞股蓝与其混伪品鉴定的新方法。方法 从GenBank中下载绞股蓝及其混伪品的ITS2序列，用软件MEGA 4.0等进行相关数据分析，通过ITS2数据库预测ITS2二级结构，并用最大简约法构建系统发育树。结果 绞股蓝与其混伪品的ITS2序列存在差异，其二级结构在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异，绞股蓝最大种内K2P遗传距离远远小于其与混伪品的最小种间K2P遗传距离，构建的系统发育树显示绞股蓝与其混伪品可明显分开。结论 基于DNA条形码的ITS2序列为绞股蓝及其混伪品的准确、简便鉴定提供了新的分子鉴定方法。
[关键词] 绞股蓝；ITS2序列；混伪品；分子鉴定
[中图分类号] R282.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2012)10(b)-0105-02
绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makino)是葫芦科(Cucurbitaceae) 绞股蓝属(Gynostemma BL.)多年生草质藤本植物，是五加科以外的植物中发现含有人参皂苷成分的药用植物之一。日本人竹本常松等通过对绞股蓝的化学成分研究证实，绞股蓝中含有80多种人参二醇性三萜皂苷。现代药理学研究表明，绞股蓝具有调节脂代谢，降血糖，延缓衰老，抗肿瘤等多种药理作用。由于绞股蓝具有多种药效及营养和保健功效，而且资源较多、价格便宜，具有十分广阔的开发前景。目前，绞股蓝已经被开发成一系列药食两用的中药类产品。但是，由于绞股蓝为草类药材，质地松脆，在采收加工、干燥、运输及储藏的过程中易干瘪、破裂，给鉴别带来困难。
随着分子生物学的发展，DNA条形码技术以其通用性强，稳定性和重复性高，有统一的操作标准和鉴定流程，不受被检测对象形态特征及发育阶段所限，易于操作和推广等优点为中药鉴定领域密切关注 ......
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