早发型重度子痫前期胎盘超微结构的临床研究(1)
[摘要] 目的 通过透视电镜定量分析早发型重度子痫前期(EOSP)患者胎盘超微结构的变化特点，探讨EOSP胎盘超微结构定量改变与围产儿不良结局的关系。方法 选择2012年1月—2014年1月在该院产科住院分娩的EOSP患者24例为EOSP组，早产孕妇30例作为对照组，采用计量的方法测定两组胎盘超微结构的参数，血管合体膜(vasculo-syncytial membrane， VSM)的厚度、微绒毛的数量、合体滋养细胞(syncytiotrophoblasts， ST)基膜至毛细血管内皮细胞基底膜(BM)的厚度、ST内脂质空泡的数量、线粒体(Mitochondria， Mito)和内质网(endoplasmic reticulum， ER)的形态结构的变化，记录新生儿出生时Apgar评分、出生体重，分析各参数变化与围产儿不良结局的关系。 结果 ①EOSP组胎盘VSM和BM厚度明显增加(P<0.01)，微绒毛数量减少(P<0.01)，差异有统计学意义，脂质空泡的数量增加；②EOSP组线粒体和内质网肿胀或者结构消失；③宫内生长受限(FGR)发病率增加，差异有统计学意义(P<0.01)，新生儿窒息增加，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 EOSP状态下，胎盘的超微结构受到损伤，可能影响胎盘的转运和合成功能，导致围产儿不良妊娠结局。
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[关键词] 早发型；重度子痫前期；胎盘超微结构
[中图分类号] R714 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)12(c)-0005-04
重度子痫前期(pre-eclampsia，PE)是指妊娠期特有的疾病，发病于34周前的重度子痫前期称早发型重度子痫前期(early-onset severe preeclampsia， EOSP)，34周以后发病者称晚发型重度子痫前期(late-onset sever preeclampsia， LOSP)。Crispit等认为，EOSP更倾向于是一种胎盘疾病。胎盘是具有多种生理功能的临时性器官，包括屏障、营养物质和代谢产物的转运，合成和分泌多种肽类和类固醇激素，保障胎儿、胎盘和母体间的代谢以及正常生长发育，胎盘结构异常直接关系到胎盘功能，从而影响胎儿的生长与发育。利用透视电镜(transmission-electron microscopy， TEM)分析2012年1月—2014年1月该院的EOSP胎盘终末绒毛的定量改变，进而揭示其形态学改变特征与围产儿不良结局之间的关系，现报道如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料
以在该院产科住院分娩的EOSP24例为研究对象，年龄20～32岁，平均年龄为(25.8±4.3)岁，孕周30～34周，平均孕周为(33.0±1.3)周；选择同期早产孕妇30例作为对照组，年龄19～34岁，平均年龄为(26.2±4.8)岁，孕周30～34周，平均孕周为(32.2±1.3)周，两组孕妇年龄、分娩时孕周差异无显著性。采用规范、统一的流行病学调查表，收集整理临床和调查的资料，设计知情同意书。
1.2 重度子痫前期的诊断标准
诊断标准参照《妇产科学》(第8版)。①血压持续升高：收缩压≥160mmHg和(或)舒张压≥110 mmHg；②蛋白尿≥2.0 g/24 h或随机蛋白尿≥(+++)；③持续性头痛或视觉障碍或其它脑神经症状；④持续性上腹部疼痛，肝包膜下血肿或肝破裂症状；⑤肝脏功能异常：肝酶ALT或AST水平升高；⑥肾脏功能异常：少尿(24 h尿量<400 mL或每小时尿量<17 mL)或血肌酐>106 μmoL/L；⑦低蛋白血症伴胸水或腹水；⑧血液系统异常：血小板呈持续性下降并低于100×109/L；血管内溶血、贫血、黄疸或血LDH升高；⑨心力衰竭、肺水肿；⑩胎儿生长受限或羊水过少。
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1.3 电镜标本的收集和处理
胎盘娩出后，立即在胎盘母体面底板区的中间带的丛密绒毛处不同部位随机取3块组织，大小约1 mm×1 mm×1 mm，浸入2.5%的戊二醛溶液中，置于4℃冰箱中保存。按照常规制成电镜标本，每个组织块随机取5张超薄切片，JEM-1010透视电镜观察。
1.4 随访新生儿出生体重和Apgar评分
记录新生儿体重，评分法是以出生后1 min内的心率、呼吸、喉反射、肌张力和皮肤颜色5项体征为依据，每项为0～2分，满分为10分。8～10分属正常新生儿，4～7分为轻度窒息，0～3分为重度窒息。
1.5 实验方法
每张切片随机选择5个视野，分别在5 000×、12 000×和25 000×随机拍摄，利用TEM Image Platform (Olympus)进行定量分析，每个胎盘记录和分析15个视野，最大限度减少个体差异。每个视野进行以下三方面测量：①5 000×下测量VSM的厚度，微绒毛间隙到胎儿毛细血管内皮细胞的垂直距离；②12 000×测量微绒毛的数量，每10 um合体滋养细胞表面微绒毛的数量；③测量合体滋养细胞基膜至毛细血管内皮细胞基底膜的厚度；④50 000×观察线粒体和25 000×观察内质网的形态结构。两名操作者进行双盲检查、分析。
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1.6 统计方法
应用SPSS17.0统计学软件处理数据，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验。
2 结果
2.1 胎盘组织超微结构的改变
2.1.1 胎盘终末绒毛透视电镜观察结果 对照组胎盘屏障的主要结构包括：毛细血管内皮细胞及其基底膜、绒毛间质、合体滋养细胞及其基膜。ST是单层多核细胞，表面有很多微绒毛，染色质沿核膜均一分布，细胞浆内线粒体丰富和内质网发达，ST基膜和毛细血管内皮细胞基底膜为连续、均一分布的薄膜，通过绒毛间质相连接(见图1-A、B、C)。EOSP组胎盘可见VSM和BM增厚，ST表面微绒毛数量减少或消失(见图1-D、E、F)。对照组胎盘线粒体双层细胞膜结构，线粒体嵴结构清晰可见，脂质空泡较少，内质网为管状结构(见图1-G、H、I)。EOSP组线粒体和内质网肿胀或者结构消失，ST内见大量空泡(见图1-J、K、L)。, http://www.100md.com(孟茜 刘福民)
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[关键词] 早发型；重度子痫前期；胎盘超微结构
[中图分类号] R714 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)12(c)-0005-04
重度子痫前期(pre-eclampsia，PE)是指妊娠期特有的疾病，发病于34周前的重度子痫前期称早发型重度子痫前期(early-onset severe preeclampsia， EOSP)，34周以后发病者称晚发型重度子痫前期(late-onset sever preeclampsia， LOSP)。Crispit等认为，EOSP更倾向于是一种胎盘疾病。胎盘是具有多种生理功能的临时性器官，包括屏障、营养物质和代谢产物的转运，合成和分泌多种肽类和类固醇激素，保障胎儿、胎盘和母体间的代谢以及正常生长发育，胎盘结构异常直接关系到胎盘功能，从而影响胎儿的生长与发育。利用透视电镜(transmission-electron microscopy， TEM)分析2012年1月—2014年1月该院的EOSP胎盘终末绒毛的定量改变，进而揭示其形态学改变特征与围产儿不良结局之间的关系，现报道如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料
以在该院产科住院分娩的EOSP24例为研究对象，年龄20～32岁，平均年龄为(25.8±4.3)岁，孕周30～34周，平均孕周为(33.0±1.3)周；选择同期早产孕妇30例作为对照组，年龄19～34岁，平均年龄为(26.2±4.8)岁，孕周30～34周，平均孕周为(32.2±1.3)周，两组孕妇年龄、分娩时孕周差异无显著性。采用规范、统一的流行病学调查表，收集整理临床和调查的资料，设计知情同意书。
1.2 重度子痫前期的诊断标准
诊断标准参照《妇产科学》(第8版)。①血压持续升高：收缩压≥160mmHg和(或)舒张压≥110 mmHg；②蛋白尿≥2.0 g/24 h或随机蛋白尿≥(+++)；③持续性头痛或视觉障碍或其它脑神经症状；④持续性上腹部疼痛，肝包膜下血肿或肝破裂症状；⑤肝脏功能异常：肝酶ALT或AST水平升高；⑥肾脏功能异常：少尿(24 h尿量<400 mL或每小时尿量<17 mL)或血肌酐>106 μmoL/L；⑦低蛋白血症伴胸水或腹水；⑧血液系统异常：血小板呈持续性下降并低于100×109/L；血管内溶血、贫血、黄疸或血LDH升高；⑨心力衰竭、肺水肿；⑩胎儿生长受限或羊水过少。
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1.3 电镜标本的收集和处理
胎盘娩出后，立即在胎盘母体面底板区的中间带的丛密绒毛处不同部位随机取3块组织，大小约1 mm×1 mm×1 mm，浸入2.5%的戊二醛溶液中，置于4℃冰箱中保存。按照常规制成电镜标本，每个组织块随机取5张超薄切片，JEM-1010透视电镜观察。
1.4 随访新生儿出生体重和Apgar评分
记录新生儿体重，评分法是以出生后1 min内的心率、呼吸、喉反射、肌张力和皮肤颜色5项体征为依据，每项为0～2分，满分为10分。8～10分属正常新生儿，4～7分为轻度窒息，0～3分为重度窒息。
1.5 实验方法
每张切片随机选择5个视野，分别在5 000×、12 000×和25 000×随机拍摄，利用TEM Image Platform (Olympus)进行定量分析，每个胎盘记录和分析15个视野，最大限度减少个体差异。每个视野进行以下三方面测量：①5 000×下测量VSM的厚度，微绒毛间隙到胎儿毛细血管内皮细胞的垂直距离；②12 000×测量微绒毛的数量，每10 um合体滋养细胞表面微绒毛的数量；③测量合体滋养细胞基膜至毛细血管内皮细胞基底膜的厚度；④50 000×观察线粒体和25 000×观察内质网的形态结构。两名操作者进行双盲检查、分析。
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1.6 统计方法
应用SPSS17.0统计学软件处理数据，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验。
2 结果
2.1 胎盘组织超微结构的改变
2.1.1 胎盘终末绒毛透视电镜观察结果 对照组胎盘屏障的主要结构包括：毛细血管内皮细胞及其基底膜、绒毛间质、合体滋养细胞及其基膜。ST是单层多核细胞，表面有很多微绒毛，染色质沿核膜均一分布，细胞浆内线粒体丰富和内质网发达，ST基膜和毛细血管内皮细胞基底膜为连续、均一分布的薄膜，通过绒毛间质相连接(见图1-A、B、C)。EOSP组胎盘可见VSM和BM增厚，ST表面微绒毛数量减少或消失(见图1-D、E、F)。对照组胎盘线粒体双层细胞膜结构，线粒体嵴结构清晰可见，脂质空泡较少，内质网为管状结构(见图1-G、H、I)。EOSP组线粒体和内质网肿胀或者结构消失，ST内见大量空泡(见图1-J、K、L)。, http://www.100md.com(孟茜 刘福民)
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