肝细胞移植治疗wilson病的潜力(2)
虽然现在未有关于肝细胞移植治疗WD的报道，但是肝细胞移植运用临床治疗肝代谢疾病，已经使得患者临床症状得到缓解并成功为患者争取到时间而进行LT手术。一例出生后不明原因的胆红素增高I型Crigler–Najjar综合症患者，移植肝细胞后至少起到了11个月的正常代谢功能，虽然患者最终仍然接受了LT手术。在一例遗传性凝血VII因子缺乏的患者治疗中，患者在接受肝细胞移植后凝血功能明显改善，并于肝细胞移植后6个月接受了原位肝移植手术。Muraca等报道称，一例糖原贮积症I型患者在接受了肝细胞移植后，其血糖情况得到了大幅度的改善，但是在随后的肝组织活检中未能证实葡萄糖-6-磷酸酶的活性增加，Gupta实验得出在LES小鼠WD模型进行了肝细胞移植后，正常肝细胞填补了AT7B基因突变肝细胞的代谢功能达到了6个月的时间。同时，对于肝细胞移植，目前尚没有一种可靠的方法可以在细胞移植一段时间后准确地检测出移植细胞的存活率[18-19]。但是在遗传性肝细胞代谢病中，可以通过分析患者的代谢改善情况以及其改善持续时间来得到肝细胞的移植存活情况。
6 肝细胞移植面临的困难
, http://www.100md.com
6.1 肝组织的质量
肝细胞移植的效果取决于分离提纯的肝细胞质量，而这又取决于供肝的质量，随着肝移植技术的不断提升，更多的肝脏被用以肝移植手术，而可用于肝细胞移植的整肝却变得越发稀少[20]。此种情况下，肝移植手术后得以遗留的保有了至少4个节段或者尾状叶得以保存的肝脏，才是真正行之有效的肝细胞来源。
6.2 培养与保存
肝细胞的优点之一即是分离后经过处理可以长期保存且可用于紧急手术和重复操作。目前，最好的长期储存人肝细胞的方法是冷冻储存，其方法业已建立。随着冻存与解冻技术的不断提升，比如Loretz在研究时发现长期保存肝细胞时最好的冻存剂是二甲亚砜( dimethyl sulfoxide，DMSO)。其可以降低培养液的冰点，防止游离态蛋白质的聚集，提高细胞膜对水的通透性，使得肝细胞活性损失越来越低。Fox指出分离而得到的原代肝细胞可以在4℃保存，达到15 h以上而保持细胞活性，而低温冻存技术保存的肝细胞亦可以在解冻到保持良好的细胞活性而运用于移植。
, http://www.100md.com
6.3 肝细胞来源
因为肝源的限制，HT 的临床研究受到很大程度的束缚，而另外寻找可以替代肝细胞的细胞来源也被提上了研究的议程，如肝脏干细胞、永生化细胞，甚至异种细胞、间充质干细胞，也在最近几年的研究中成为了一个新的热点。除了细胞数量以外，多次的细胞移植也是具有积极意义的。因为多次移植可以有效地减少手术移植当中可能存在的失误，并且能通过多次移植过程观察到病人是否有明显的症状改善。
6.4 免疫抑制
虽然肝脏被认为是免疫特惠的器官，到目前为止，肝细胞移植动物模型实验尚没有一个公认的移植后免疫抑制治疗方案，大多数免疫抑制治疗仍然使用的是肝脏移植的方案。有文献指出，HLA的配型可以影响到排斥反应的强弱，相符的HLA会减弱肝细胞移植后受体的排斥反应，但是相应地可能会促进移植肝细胞肝功能的丧失，特别是因自身免疫性或感染疾病而引起的肝功能损害。鉴于此，在一些肝细胞移植手术中，双方肝细胞仅仅是接受了ABO血型的配对而未接受HLA配对，以部分移植肝细胞的功能减低来降低免疫排斥反应。
, http://www.100md.com
7 肝细胞移植的前景
有相当多的动物实验和临床研究已经表明，人肝细胞移植对肝衰竭和肝脏代谢性疾病治疗的原理已得到证实，移植的方法也已建立，其安全性高，患者免疫排斥小，无需终生依赖免疫抑制剂。肝细胞经分离提纯后进行低温保存可随取随用，克服了肝移植的时间限制，随着肝细胞移植研究的不断深入，其必将为人类健康做出更多的贡献。
[参考文献]
[1] 杨健. 肝豆状核变性的研究进展(一)[J].海南医学，2013，24(6)：892-898.
[2] 张海云，程楠，韩咏竹.Wilson病的流行病学研究进展[J].安徽医学，2014(3)：400-402.
[3] Huster D. Wilson disease[J].Best Pract Res Cl Ga，2010，24(5)：531-535.
, 百拇医药
[4] Dhawan A， R. Taylor， P. Cheeseman， et al. Wilson’s disease in children： 37-year experience and revised King’s score for liver transplantation. Liver. Transplant，2005(11)：441-448.
[5] Ala A， Walker AP， Ashkan K，et al. Wilson's disease[J]. Lancet，2007，369(9595)： 397-408.
[6] Cheng N，Wang K，Hu WB， et al. Wilson disease in the south Chinese Han population[J].Can J Neurol Sci， 2013.
[7] Mak CM，Lam CW. Diagnosis of Wilson’s disease： a comprehensive review[J].Crit Rev Cl Lab Sci， 2008，45(3)：263 -290.
[8] Litwin T， Gromadzka G， Czlonkowska A. Gender differences in Wilson's disease[J]. J Neurol Sci， 2012，312(1)：31-35.
[9] Sinha S， Taly A， Ravishankar S， et al. Wilson’s disease： cranial MRI observations and clinical correlation. Neuroradiology，2006，48(9)：613-621., 百拇医药(肖骁 彭强)
6 肝细胞移植面临的困难
, http://www.100md.com
6.1 肝组织的质量
肝细胞移植的效果取决于分离提纯的肝细胞质量，而这又取决于供肝的质量，随着肝移植技术的不断提升，更多的肝脏被用以肝移植手术，而可用于肝细胞移植的整肝却变得越发稀少[20]。此种情况下，肝移植手术后得以遗留的保有了至少4个节段或者尾状叶得以保存的肝脏，才是真正行之有效的肝细胞来源。
6.2 培养与保存
肝细胞的优点之一即是分离后经过处理可以长期保存且可用于紧急手术和重复操作。目前，最好的长期储存人肝细胞的方法是冷冻储存，其方法业已建立。随着冻存与解冻技术的不断提升，比如Loretz在研究时发现长期保存肝细胞时最好的冻存剂是二甲亚砜( dimethyl sulfoxide，DMSO)。其可以降低培养液的冰点，防止游离态蛋白质的聚集，提高细胞膜对水的通透性，使得肝细胞活性损失越来越低。Fox指出分离而得到的原代肝细胞可以在4℃保存，达到15 h以上而保持细胞活性，而低温冻存技术保存的肝细胞亦可以在解冻到保持良好的细胞活性而运用于移植。
, http://www.100md.com
6.3 肝细胞来源
因为肝源的限制，HT 的临床研究受到很大程度的束缚，而另外寻找可以替代肝细胞的细胞来源也被提上了研究的议程，如肝脏干细胞、永生化细胞，甚至异种细胞、间充质干细胞，也在最近几年的研究中成为了一个新的热点。除了细胞数量以外，多次的细胞移植也是具有积极意义的。因为多次移植可以有效地减少手术移植当中可能存在的失误，并且能通过多次移植过程观察到病人是否有明显的症状改善。
6.4 免疫抑制
虽然肝脏被认为是免疫特惠的器官，到目前为止，肝细胞移植动物模型实验尚没有一个公认的移植后免疫抑制治疗方案，大多数免疫抑制治疗仍然使用的是肝脏移植的方案。有文献指出，HLA的配型可以影响到排斥反应的强弱，相符的HLA会减弱肝细胞移植后受体的排斥反应，但是相应地可能会促进移植肝细胞肝功能的丧失，特别是因自身免疫性或感染疾病而引起的肝功能损害。鉴于此，在一些肝细胞移植手术中，双方肝细胞仅仅是接受了ABO血型的配对而未接受HLA配对，以部分移植肝细胞的功能减低来降低免疫排斥反应。
, http://www.100md.com
7 肝细胞移植的前景
有相当多的动物实验和临床研究已经表明，人肝细胞移植对肝衰竭和肝脏代谢性疾病治疗的原理已得到证实，移植的方法也已建立，其安全性高，患者免疫排斥小，无需终生依赖免疫抑制剂。肝细胞经分离提纯后进行低温保存可随取随用，克服了肝移植的时间限制，随着肝细胞移植研究的不断深入，其必将为人类健康做出更多的贡献。
[参考文献]
[1] 杨健. 肝豆状核变性的研究进展(一)[J].海南医学，2013，24(6)：892-898.
[2] 张海云，程楠，韩咏竹.Wilson病的流行病学研究进展[J].安徽医学，2014(3)：400-402.
[3] Huster D. Wilson disease[J].Best Pract Res Cl Ga，2010，24(5)：531-535.
, 百拇医药
[4] Dhawan A， R. Taylor， P. Cheeseman， et al. Wilson’s disease in children： 37-year experience and revised King’s score for liver transplantation. Liver. Transplant，2005(11)：441-448.
[5] Ala A， Walker AP， Ashkan K，et al. Wilson's disease[J]. Lancet，2007，369(9595)： 397-408.
[6] Cheng N，Wang K，Hu WB， et al. Wilson disease in the south Chinese Han population[J].Can J Neurol Sci， 2013.
[7] Mak CM，Lam CW. Diagnosis of Wilson’s disease： a comprehensive review[J].Crit Rev Cl Lab Sci， 2008，45(3)：263 -290.
[8] Litwin T， Gromadzka G， Czlonkowska A. Gender differences in Wilson's disease[J]. J Neurol Sci， 2012，312(1)：31-35.
[9] Sinha S， Taly A， Ravishankar S， et al. Wilson’s disease： cranial MRI observations and clinical correlation. Neuroradiology，2006，48(9)：613-621., 百拇医药(肖骁 彭强)