T细胞检测和荧光PCR检测在结核分枝杆菌检测中的比较(2)
结果判定:(1)强阳性对照的荧光读值应>300。(2)弱阳性对照的荧光读值应在100~150之间。(3)阴性对照的荧光读值应<65。
1.3.2 结核分枝杆菌T细胞检测 (1)T细胞的分离:用肝素锂抗凝采血管采集待检者外周血6 mL,将血液与预热至室温的 RPMI1640 不完全培养液按照体积比 1:1 的比例混匀。按照混匀血样与ficoll淋巴细胞分离液的体积比为2:1 的比例,小心的将血样加在离心管中ficoll淋巴细胞分离液上层,离心细胞,将18 ℃× 1000 g离心20 min。收集细胞层。洗涤收集的细胞,18 ℃× 600 g离心 7 min。重复洗涤1次。将洗涤好的细胞重置于 2 mL AIM-V 培养液中,计数,调整细胞浓度为 2.5×106个/mL。(2)检测:严格按照T细胞检测试剂盒进行检测。
结果判定:(1) 当阴性对照孔斑点数若为 0~5 时,若 TB 刺激物孔比阴性孔紫色斑点数≥5 个,则判为阳性。反之,判为阴性 ......
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