坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis， NEC)是新生儿尤其是早产儿时的严重胃肠道疾病，预后差，国内该病的病死率为10% ～50%[1]。研究证实，细胞凋亡是NEC早期肠上皮细胞死亡的主要形式，是NEC进一步发展的必经阶段[2]。肿瘤坏死因子-α、脂多糖内毒素、血小板活化因子等在NEC的发病中起重要作用[3]。尽管目前对NEC发病机制研究取得很大进展，但分子生物学机制还没完全阐明，缺乏特效的治疗手段[4]。本实验旨在通过母乳[5]干预Caco-2细胞缺氧复氧损伤， 研究其促炎细胞因子表达情况，探讨母乳防治NEC的作用机制，报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 母乳成份上清液的提取

    生后2～4 d的母乳(来自该院产科2012年6月—2013年12月正常分娩产妇)存于 4 ℃ 冰箱， 在24 h内处理， 12 000 r/ min离心10 min去除脂肪成分和细胞碎片， 保留乳清(未加热乳清)用于实验，通过煮沸5 min以灭活热敏感蛋白或多肽，再次12 000转/min离心10 min获得上清液为灭活乳清，未加热乳清和灭活乳清均存于-20 ℃ 冰箱备用。

    1.2 Caco-2细胞培养

    Caco-2细胞(细胞株购自中科院上海细胞库)适宜在37 ℃、5% CO2和90%相对湿度的环境中培养 ......