1.5 细胞免疫表型检测

    取1×106 个细胞采用Live/Dead染色后，加入CD3、CD4、CD8、CD19和CXCR5流式抗体，避光孵育30 min，1 mL PBS洗涤后弃上清，100 uL PBS重悬，流式检测。

    1.6 统计方法

    采用SPSS 20.0统计学软件进行处理。组间比较采用两独立样本非参数检验，P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 密度梯度离心法获得的淋巴细胞活力较好。

    采用AIM-V培养外周血免疫细胞3 d，标记Live/Dead后采用流式检测。结果表明，与密度梯度离心获得的淋巴细胞相比，全血红细胞裂解获得的淋巴细胞活力显著降低(85.90% vs 92.70%，P<0.05)，可见红细胞裂解法获得的淋巴细胞活力欠佳，不适宜于体外长期培养，见图1 ......